[发明专利]一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂及其制备方法在审
申请号: | 201810304417.5 | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN108587944A | 公开(公告)日: | 2018-09-28 |
发明(设计)人: | 刘海明 | 申请(专利权)人: | 北京航天恒丰科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/16;C12N1/14;C05F11/08;C12R1/10;C12R1/72;C12R1/885;C12R1/69;C12R1/645 |
代理公司: | 北京细软智谷知识产权代理有限责任公司 11471 | 代理人: | 王金宝 |
地址: | 102402 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复合菌剂 发酵 制备 乳酸菌 农用废弃物 微生物 产朊假丝酵母 地衣芽孢杆菌 绿色木霉 杂菌污染 最终成品 培养基 白腐菌 米曲霉 复配 菌剂 菌种 抵抗 | ||
1.一种用于农用废弃物发酵的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包括地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌,所述地衣芽孢杆菌、乳酸菌、产朊假丝酵母、绿色木霉、米曲霉和白腐菌的数量比为:7-9:1-3:3-5:2-4:1-3:1-3。
2.根据权利要求1所述的复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂采用如下制备方法制备而成:
A、将各菌种分为细菌组、酵母菌组和真菌组,分别经过发酵培养后,分别得到细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液;
B、将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后,得到所述复合菌剂。
3.根据权利要求2所述的复合菌剂,其特征在于,步骤A中,所述细菌菌液的制备方法为:将地衣芽孢杆菌和乳酸菌混合,在细菌种子培养基、36-38℃下培养16-20小时;然后在细菌摇床培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下培养12-16小时;最后在细菌发酵培养基、36-38℃、摇床转速为120-160r/min下发酵培养16-20小时,发酵培养完成后获得母液,即为细菌菌液;
所述细菌种子培养基由以下重量百分数的组分制成:蔗糖5-10%,牛肉膏4-8%,磷酸氢二钠0.1-0.3%,琼脂1.5-2.5%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
所述细菌摇床培养基由以下重量百分数的组分制成:蔗糖10-15%,豆粕粉6-10%,牛肉膏0.5-1%,酵母膏2-5%,硫酸镁0.1-0.3%,磷酸氢二钠0.1-0.4%,余量为水,pH值为7.0-7.5;
所述细菌发酵培养基由以下重量百分数的组分制成:蔗糖7-12%,豆粕粉0.5-1%,酵母膏4-6%,硫酸镁0.15-0.25%,磷酸氢二钠0.15-0.25%,磷酸二氢钾0.1-0.3%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
4.根据权利要求2所述的复合菌剂,其特征在于,步骤A中,所述酵母菌菌液的制备方法为:将产朊假丝酵母在酵母菌种子培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养18-24小时;然后在酵母菌发酵培养基、29-33℃、摇床转速为140-160r/min下发酵培养36-48小时,发酵培养完成后获得母液,即为酵母菌菌液;
所述酵母菌种子培养基为:蔗糖8-12%,酵母膏0.7-1%,硫酸镁0.05-0.15%,氯化钙0.004-0.008%,其余为水,pH为4.5-5.0;
所述酵母菌发酵培养基为:蔗糖20-30%、牛肉膏0.4-0.6%、磷酸氢二钾0.1-0.2%、硫酸镁0.05-0.08%、氯化钙0.004-0.008%,其余为水,pH为4.5-5.0。
5.根据权利要求2所述的复合菌剂,其特征在于,步骤A中,所述真菌菌液的制备方法为:将绿色木霉、米曲霉和白腐菌混合,在PD培养基、28-32℃、摇床转速为140-160r/min下培养24-36小时;然后在真菌发酵培养基、29-33℃下静置培养64-72小时,培养完成后获得母液,即为真菌菌液;
所述PD培养基为马铃薯葡萄糖培养基;
所述真菌发酵培养基的含水量为55%,还包括硫酸铵0.5%和硫酸镁0.05%,真菌发酵培养基含有的其他固体成分为麸皮和玉米粉,麸皮和玉米粉的重量比为8-10:0.8-1.2。
6.根据权利要求2所述的复合菌剂,其特征在于,步骤B中,将步骤A得到的所述细菌菌液、酵母菌菌液和真菌菌液混合均匀后,接种到综合培养基上,在28-32℃、摇床转速为120-140r/min下发酵培养,检测有效活菌总数达到1亿cfu/mL时,发酵培养结束,得到所述复合菌剂;
所述综合培养基由以下重量百分数的组分制成:蔗糖5-10%,蜂蜜1-2%,抗坏血酸0.2-0.5%,硫酸镁0.1-0.3%,磷酸氢二钠0.1-0.4%,磷酸二氢钾0.1-0.5%,余量为水,pH值为7.0-7.5。
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