[发明专利]检测ACE基因多态性的引物、探针及应用、试剂盒和检测方法

说明书

本发明涉及指导高血压用药指导的基因检测。包括检测ACE(rs4646994)多态性的引物、探针及其应用。所述引物和探针能在荧光定量PCR平台上有效地检测出插入/缺失突变型的ACE(rs4646994)基因，操作方法简单易行，即降低污染风险，又提高效率，为高血压的临床用药提供了一个简捷判断的新途径，具有极高的临床应用价值。

技术领域

本发明涉及分子生物学和医学领域，具体涉及指导高血压用药相关性SNP 位点的检测组合物、试剂盒和检测方法。

背景技术

目前临床常用的抗高血压药物有5大类：利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂、 血管紧张素受体阻滞剂、β受体阻滞剂、钙离子拮抗剂。药物在体内代谢过程 中涉及到多种药物代谢酶、转运体和受体，它们存在的基因多态性最终导致了患 者以相同方式服用同种药物时，其治疗效果、产生的不良发展及其对药物的耐受 性等方面存在明显的个体差异。

目前，基于药物基因学组的高血压研究主要关注基因的多样性与药物降压疗 效的关系，不同人种、年龄、性别以及饮食和生活环境造成的基因差异对药物降 压疗效的影响等，较少关注基因突变对药物降压后远期影响。未来高血压药物基 因学组研究应是多学科，包括分子生物学、临床医学、遗传学、数学、社会学等 共同协作的系统研究工程，不但关注基因与生理、病理之间的关系，还要关注基 因与环境、人文、社会之间的关系，为最终高血压等疾病预防和治疗提供依据。

由于不同个体的遗传差异、人种、年龄、性别及饮食和生活环境等各种因素 的相互作用，使不同个体和群体对于高血压的易感性和降压药物的反应在性别、 种族和年龄方面也呈现出不同的效应。对于高血压的治疗应是防治并举。随着基 因防治时代的来临，通过基因测试，对于不同的易感人群进行不同个体的早期预 防，通过基因测试和综合因素的评估，为其提供适宜的个体化治疗，使其用药达 到安全、有效、经济。

发明内容

为克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供了一种指导高血压用药的检 测组合物，包括分别检测CYP2C9*3基因、CYP2D6基因、CYP3A5*3基因、 ADRB1基因、AGTR1基因、ACE基因和NPPA基因多态性的试剂。

更进一步地，检测的是CYP2C9*3基因的rs1057910位点、CYP2D6基因的 rs1065852位点、CYP3A5*3基因的rs776746位点、ADRB1基因的rs1801253位 点、AGTR1基因的rs5186位点、ACE基因的rs4646994位点和NPPA基因的rs5065 位点的多态性。

检测上述基因多态性的试剂可以根据不同的检测原理和方法选择不同的试 剂作为检测组合物。其中一种类型的检测组合物的试剂包括基于上述基因多态性 位点而设计的扩增引物和探针，探针是分别针对基因多态性位点设计的野生型和 突变型的两条探针。

将所述检测组合物应用于指导高血压用药的检测试剂盒，其中组合物包括检 测CYP2C9*3基因多态性、CYP2D6基因、CYP3A5*3基因、ADRB1基因、AGTR1 基因、ACE基因和NPPA基因多态性的试剂。

本发明还提供了操作便捷的指导高血压用药的检测试剂盒，包括分别检测CYP2C9*3基因多态性、CYP2D6基因、CYP3A5*3基因、ADRB1基因、AGTR1 基因、ACE基因和NPPA基因多态性的试剂。

上述提到的扩增引物和探针，分别选自：

扩增CYP2C9*3(rs1057910)的引物和探针序列：

CYP2C9*3(rs1057910)上游引物：ATTTAATGTCACAGGTCACTGC(SEQ NO1)