[发明专利]一种利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法

权利要求书

1.一种利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于步骤为：采用环糊精水解酶催化水解底物环糊精，反应结束后通过酶灭活、脱盐和干燥，制得麦芽低聚糖；具体步骤为：按照配置质量浓度为30mg/g的pH=7的β-CD溶液30mL为底物，加入50U的环糊精水解酶，在40℃条件下反应24h；随后将酶灭活，脱盐，干燥，最终得到麦芽七糖；

所述环糊精水解酶的氨基酸序列具体如SEQ ID NO.1所示，核苷酸序列为SEQ ID NO.2所示；

所述底物环糊精具体为α-环糊精、β-环糊精或γ-环糊精；包括以α-1,4键连接，含不同个数的α-D吡喃葡萄糖的环状糊精；底物环糊精聚合度为7。

2.根据权利要求1所述利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于具体步骤为： 配置质量浓度为30mg/g的pH=7的β-CD溶液30mL为底物，加入50U的环糊精水解酶，在40℃条件下反应24h，反应结束后用反应液体积5%、0.4M的KOH将酶灭活，随后采用等量的0.4M的硫酸进行中和；脱盐柱脱盐；最后将产物置于60℃，真空干燥48h，产品中主产物为麦芽七糖。

3.根据权利要求1所述利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于：所述酶灭活方法包括酸灭活，碱灭活或高温灭活；

所述酸灭活方式为添加反应总体积0.1%-10% v/v，浓度为0.1-5M的酸灭活，再添加等量的浓度为0.1-5M的碱中和至pH为5.0-8.0；

碱灭活方式为添加反应总体积0.1%-10% v/v，浓度为0.1-5M的碱灭活，再添加等量的浓度为0.1-5M的酸中和至pH为5.0-8.0；

高温灭活方式为将温度升到100-120℃，保温15-120min。

4.根据权利要求3所述利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于：所述碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或氢氧化铵；所述酸为盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、乙酸、柠檬酸、高氯酸或甲酸。

5.根据权利要求1所述利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于：所述脱盐方式为透析脱盐或脱盐柱脱盐。

6.根据权利要求1所述利用环糊精水解酶制备特定聚合度麦芽低聚糖的方法，其特征在于：所述干燥方法包括冷冻干燥、常压干燥、减压干燥或喷雾干燥。