[发明专利]一种咖啡酸糖苷类化合物、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种咖啡酸糖苷类化合物，其具有如下结构：其命名为：顺式‑1‑O‑甲基‑6‑O‑咖啡基‑β‑D‑葡萄糖，分子式为C₁₆H₂₀O₉。本发明还公开了所述咖啡酸糖苷类化合物的制备方法及其抗氧化和清除卷烟烟气中自由基的用途。

技术领域

本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种咖啡酸糖苷类化合物、其制备方法及应用。

背景技术

三叶悬钩子(Rubus delavayi Franch)又名倒钩刺、小乌泡、刺茶、小鸡脚锁梅，为蔷薇科悬钩子属植物，也是云南省特有的植物。三叶悬钩子是傈僳族、怒族的常用药，也常用来泡茶。三叶悬钩子具有清热解毒，除湿止痢，祛风解表，驱蛔虫的功效；用于治疗扁桃体炎，感冒，急性结膜炎，痢疾，疮疡，风湿性关节炎。

目前，国内外对三叶悬钩子的研究较少。段泽虎在多年的中兽医临床工作中，通过对数百例畜病，如乳腺炎、无名肿毒、肝癀、肝热传眼、肝毒、黄疸、湿毒、肚底黄、外伤炎肿、术后炎肿、血吸虫病，弓形虫病、驱蝇蛆等病的应用观察和验证，认为三叶悬钩子在清热解毒、除湿止痢及杀虫方面有独到的功效，对消炎消肿功能好而不伤元气，是一剂难得的高效低毒的中草药。郑玲等从三叶悬钩子的甲醇提取物中分离、鉴定出委陵菜酸、山奈酚等12个化学成分。

本发明从民族药三叶悬钩子中分离得到了一种咖啡酸糖苷类化合物，活性研究表明该化合物具有较好的抗氧化活性，尤其是将其用作民族药三叶悬钩子添加剂，具有很好的清除自由基抗氧化活性的效果，对提高卷烟品质具有积极意义。目前民族药三叶悬钩子中发现咖啡酸糖苷类化合物的清除卷烟烟气自由基效果还未见相关文献报道过。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种咖啡酸糖苷类化合物；第二目的在于提供所述咖啡酸糖苷类化合物的制备方法；第三目的在于提供所述咖啡酸糖苷类化合物的应用，主要用于清除卷烟主流烟气中的自由基。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的第方面涉及一种咖啡酸糖苷类化合物是从民族药三叶悬钩子中分离得到，其分子式为C₁₆H₂₀O₉，结构如下所示：

该化合物为浅黄色粉末，命名为：顺式-1-O-甲基-6-O-咖啡基-β-D-葡萄糖，英文名为：cis-1-O-methyl-6-O-caffeoyl-β-D-glucopyranose。

本发明的第二方面涉及上述的咖啡酸糖苷类化合物的制备方法，所述咖啡酸糖苷类化合物是以民族药三叶悬钩子为原料，依次经浸膏提取、有机溶剂萃取、硅胶柱层析和高效液相色谱分离步骤制得，具体步骤为：

(1)浸膏提取：将三叶悬钩子茎和叶粉碎后用第一溶剂提取，然后除去第一溶剂得到粗提取物；

(2)有机溶剂萃取：将步骤(1)得到的粗提物悬浮于水中，用第二溶剂萃取，然后除去第二溶剂，得到黑色浸膏；将黑色浸膏进行树脂柱层析，依次用水、甲醇和丙酮低速洗脱，取甲醇洗脱液，除去甲醇得到甲醇浸膏；

(3)柱层析：以氯仿与甲醇体积比1:1的混合溶剂溶解步骤(2)得到甲醇浸膏，然后吸附在200～300目的硅胶上，干法装柱；以氯仿与甲醇的体积比为1:0,50:1,20:1,10:1,1:1的混合溶剂进行梯度洗脱；取10:1的洗脱液，除去溶剂得到洗脱样品A；用甲醇溶解洗脱样品A，将其吸附在RP-18上，干法柱层析，依次以5v/v％甲醇、70v/v％甲醇、85v/v％甲醇、100v/v％甲醇洗脱；取5v/v％甲醇洗脱液，除去溶剂得到洗脱样品B；将洗脱样品B用氯仿与甲醇体积比13:1的混合溶剂经硅胶柱反复柱层析，再用氯仿与甲醇体积比1:2的混合溶剂经Sephadex LH-20柱层析，得到所述的咖啡酸糖苷类化合物及其反式异构体的混合物；