[发明专利]一种利用烈性溶藻弧菌噬菌体快速鉴定溶藻弧菌的方法及试剂盒在审
申请号: | 201810042440.1 | 申请日: | 2018-01-17 |
公开(公告)号: | CN107937623A | 公开(公告)日: | 2018-04-20 |
发明(设计)人: | 姜宗然;付汉清;郭立 | 申请(专利权)人: | 厦门昶科生物工程有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 361000 福建省厦门*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 烈性 弧菌 噬菌体 快速 鉴定 方法 试剂盒 | ||
1.一种利用烈性溶藻弧菌噬菌体快速鉴定溶藻弧菌的方法,包括以下步骤:
1)将待检菌种涂布于LB琼脂平板上,静置15~20min,获得待检平板;
2)将烈性溶藻弧菌噬菌体滴加至所述待检平板上,获得鉴定体系;
3)将所述步骤2)中获得的鉴定体系在28~35℃下静置培养8~16h,如果有噬菌斑出现,则待检菌种为溶藻弧菌。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述烈性溶藻弧菌噬菌体为含有10种以上烈性溶藻弧菌噬菌体的混合液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述待检菌种的浓度为107~109cfu/mL,涂布体积为100~200μl。
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述的烈性溶藻弧菌噬菌体的效价为108~1010pfu/mL,滴加体积为20~50μl。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述溶藻弧菌噬菌体的获取方法包括以下步骤:
S1、将分离到的溶藻弧菌噬菌体与宿主菌溶藻弧菌混合培养,获得培养液;
S2、将所述培养液固液分离,收集液相组分为溶藻弧菌噬菌体。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述固液分离的方法为离心。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述离心的转速为1000~12000rpm,所述离心的时间为5~20min。
8.一种快速鉴定溶藻弧菌的试剂盒,其特征在于,包括烈性溶藻弧菌噬菌体。
9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述烈性溶藻弧菌噬菌体的效价为108~1010pfu/mL。
10.根据权利要求8或9所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括LB琼脂平板。
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