[发明专利]包含金属结合基序的IgG结合多肽的靶-结合多肽突变体

权利要求书

1.IgG-结合多肽的靶-结合多肽突变体，其包含金属结合基序，其中靶结合在金属离子的存在下发生，其中所述多肽突变体是从葡萄球菌蛋白A (SpA)结构域B衍生的结构域Z的Fc-结合突变体，其中金属结合基序插入在结构域Z的螺旋2和3之间，其中金属结合基序是钙结合的，和靶结合是在钙离子的存在下进行的，并且其中所述多肽突变体选自SEQ ID NO1-9。

2.依据权利要求1的多肽突变体，其包含在金属结合基序序列之前的接头。

3.一种配体，其包含依据权利要求1-2中任一项的多肽突变体。

4.依据权利要求3的配体，其包含SEQ ID NO 8所示的多肽突变体。

5.依据权利要求3或4的配体的多肽的多聚体，其选自二聚体、三聚体、四聚体、五聚体或六聚体。

6.依据权利要求3或4的配体的多肽的多聚体，其是四聚体。

7.一种色谱基质，其包含与其偶联的依据权利要求3或4的配体或依据权利要求5或6的其多聚体。

8.一种纯化样品蛋白的方法，其包括在金属离子的存在下，将靶或样品蛋白结合至依据权利要求3-6中任一项的配体或多聚体配体；并通过加入金属结合分子洗脱结合的蛋白，其中所述靶或样品蛋白是IgG或Fc-融合蛋白，并且其中所述金属离子是钙离子。

9.依据权利要求8的方法，其中所述多聚体配体是四聚体。

10.依据权利要求8或9的方法，其中所述配体或多聚体配体被固定到固相。

11.依据权利要求8或9的方法，其中结合的蛋白在4.5以上的pH下被洗脱。

12.依据权利要求11的方法，其中结合的蛋白在pH 5-7下被洗脱。

13.依据权利要求12的方法，其中结合的蛋白在pH 5.4-5.6下被洗脱。

14.依据权利要求8或9的方法，其中用金属结合分子的洗脱是用螯合剂。

15.编码选自SEQ ID NO 1-9的多肽的核酸。

16.一种表达载体，其包含权利要求15的核酸。

17.依据权利要求1-2中任一项的IgG-结合多肽的靶-结合多肽突变体和/或其多聚体作为用于色谱的固定化配体的用途。