[发明专利]高效便捷提取水稻DNA的方法在审
申请号: | 201711498735.1 | 申请日: | 2017-12-30 |
公开(公告)号: | CN108531546A | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
发明(设计)人: | 刘佳音;张国栋;邵晓宇;邹丹丹;张继雨;张佩;王晶;米铁柱 | 申请(专利权)人: | 青岛袁策生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人: | 李冰 |
地址: | 266000 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水稻DNA 缓冲液 放入 新鲜叶片 模板DNA 打孔器 封板膜 提取液 混匀 加样 加热 取出 申请 | ||
1.一种高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将200μL96孔PCR板置于冰上,用打孔器分别取2片新鲜叶片放入PCR板上;
(2)每孔加入70μL缓冲液A,用封板膜封好,立刻将平板放入PCR仪中加热到95℃,保持10min;
(3)取出平板,迅速加入等体积的缓冲液B,混匀。
2.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,进一步的,步骤(3)中的提取液1μL能够直接作为模板DNA进行PCR检测。
3.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,进一步的,如需存留一周以上的时间进行PCR检测,则用排枪吸取上述提取液40μL到一块新的200μL 96孔PCR孔板内,加入3倍提取液体积的TE缓冲液;放入4℃冰箱保存,备用。
4.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,进一步地,步骤(2)中所述缓冲液A为新鲜溶液。
5.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(2、)中所述缓冲液A进一步包括:800μL 20%Tween20。
6.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(2)中所述缓冲液A进一步包括:160μL 5mol/L NaOH。
7.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(2)中所述缓冲液A进一步包括:7.04mL ddH2O 。
8.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(3)中所述缓冲液B进一步包括:1mL pH8.01mol/L Tris-HCl。
9.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(3)中所述缓冲液B进一步包括:40μL pH8.00.5mol/LEDTA。
10.根据权利要求1所述高效便捷提取水稻DNA的方法,其特征在于,步骤(3)中所述缓冲液B进一步包括:8.96mL ddH2O。
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