[发明专利]地加瑞克关键四肽中间体的制备方法

说明书

本发明涉及地加瑞克关键四肽中间体的制备方法。N‑乙酰‑D‑萘‑2‑丙酰胺‑4‑氯‑D‑苯丙氨酸和D‑吡啶基‑‑3‑丙氨酰‑L‑丝氨酸苄酯三氟乙酸盐经缩合、水解等步骤得到地加瑞克多肽片断N‑乙酰基‑D‑萘2‑丙氨酰‑4‑氯‑D‑苯丙氨酰‑D‑吡啶基‑3‑丙氨酰‑L‑丝氨酸。本发明的制备方法能够有效避免和除去多肽合成中的产生的杂质，高纯度高收率的制备地加瑞克多肽片段。

技术领域

本发明涉及多肽合成领域，具体涉及一种用于制备十肽地加瑞克的关键四肽中间体的制备方法。

背景技术

前列腺癌是工业化世界中导致男性发病和死亡的主要原因。地加瑞克，也被称为FE200486，是第三代促性腺激素释放激素(GnRH)受体拮抗剂(GnRH阻滞剂)，其已经被开发并在最近被批准用于需要雄激素阻断疗法的前列腺癌患者。地加瑞克通过直接且竞争性阻滞脑垂体中的GnRH受体而起作用，并且与其他GnRH拮抗剂一样，不会引起经由下丘脑-脑垂体-性腺轴的促黄体激素产生的初始刺激，并且因此不会引起睾酮激增或临床爆发。

地加瑞克是一种合成的直链十肽，其含有七个非天然氨基酸，其中五个是D-氨基酸。在该十肽的主链中具有十个手性中心。在序列的位置5处的氨基酸残基在侧链取代中具有额外的手性中心，产生总共十一个手性中心。其CAS登记号是214766-78-6(游离碱)，并且其以商标Firmagon^TM可商购获得。该药物物质在化学上被命名为D-丙氨酰胺，N-乙酰基-3-(2-萘基)-D-丙氨酰-4-氯-D-苯丙氨酰-3-(3-吡啶基)-D-丙氨酰-L-丝氨酰-4-[[[(4S)-六氢-2，6-二氧代-4-嘧啶基]羰基]氨基]-L-苯丙氨酰-4-[(氨基羰基)氨基]-D-苯丙氨酰-L-亮氨酰-N6-(1-甲基乙基)-L-赖氨酰-L-脯氨酰-并且由以下化学结构表示：

地加瑞克的结构也可以表示为：Ac-D-2Nal-D-4Cpa-D-3Pal-Ser-4Aph(L-Hor)-D-4Aph(Cbm)-Leu-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH₂。

CN102428097B报道了在地加瑞克的合成过程中，中间体Fmoc-4Aph(Hor)-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-树脂在碱性条件下脱保护的过程中发生部分重排而成为Fmoc-X-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-树脂，X为4-([2-(5-乙内酰脲基)]-乙酰基氨基)-苯丙氨酸。可以预见，由Fmoc-4Aph(Hor)-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-Ala-NH-树脂得到的地加瑞克产物被相应量的Ac-D-2Nal-D-Phe(4Cl)-D-3Pal-Ser-X-D-4Aph(Cbm)-Leu-ILys-Pro-D-A la-NH₂污染。地加瑞克是给予人类的药物的活性成分，因此其不能被任何含量超过产品的0.3重量％的杂质污染。因此，适合人类使用的地加瑞克中，乙内酰脲副产物的量不允许多于0.3重量％。因为包含乙内酰脲部分的副产物在结构上与地加瑞克非常相似，因此难以将它们分离。如果进行尝试，则可以预见分离会导致产品的显著损失。因此，在采用保护基Fmoc的药物级地加瑞克的制造工艺中，应当避免碱性条件。

US5925730A报道了地加瑞克的合成中优选的α-氨基保护基是叔丁氧基羰基(Boc)。而且，还揭示了多种其它众所周知的保护基，例如芴甲氧羰基(Fmoc)。Boc基团的优点在于，被其保护的α-氨基可在酸性条件下通过三氟乙酸(TFA)的标准处理解封闭。TFA的缺点在于，其对人类的毒性高，这使得制造人员处于危险之中。TFA的另一缺点在于，其对环境具有毒性，这导致其处置成本高，一旦处置不当就会污染环境。

辉凌在专利US5925730中最早采用了Boc固相合成策略，采用三氟乙酸脱除Boc保护基。虽然有效地避免乙内酰脲类似物杂质的产生，但Boc固相合成策略在肽树脂裂解时需要采用HF，HF对人和环境有较大的危害，难以进行规模化生产。