[发明专利]一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法在审
申请号: | 201711349192.7 | 申请日: | 2017-12-15 |
公开(公告)号: | CN108148913A | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 龚理;孔晓瑜 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 316000 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 扩增产物 分子生物学 快速鉴别 条带 核糖体内转录间隔区 琼脂糖凝胶电泳 基因组DNA 测序过程 工作效率 扩增反应 凝胶电泳 形态鉴定 种类鉴别 鉴别 节约 分析 | ||
1.一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法,其特征在于:所述方法的过程为:提取两种条鳎的基因组DNA,分别以提取的DNA为模板进行核糖体内转录间隔区1(ITS1)扩增反应,对两种扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,比较扩增产物长度,条带长度值大的为缨鳞条鳎,条带短长度值小的为日本条鳎,其中扩增所采用的上游引物序列为:TACCGATTGGATGGTTTAG,下游引物序列为:AAGCGACCCTCAGACAGGCG。
2. 根据权利要求1所述的一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法,其特征在于:所述扩增反应体系为:取100ng模板DNA,0.5μL浓度为10μmol/L的上游引物,0.5μL浓度为10μmol/L的下游引物,2.5μL 10×buffer,0.5μL浓度为10mmol/L的dNTP,1.5μL浓度为25mmol/L的MgCl2,0.2μL Taq聚合酶混合,加双蒸水至25μL。
3.根据权利要求1所述的一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法,其特征在于:所述扩增反应条件为:95℃预变性5min,然后95℃变性20s,60℃退火20s,72℃延伸1min,进行30个循环,最后72℃延伸5min。
4.根据权利要求1所述的一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法,其特征在于:所述基因组DNA的提取采用标准酚-氯仿法。
5.根据权利要求1所述的一种快速鉴别日本条鳎和缨鳞条鳎的分子生物学方法,其特征在于:所述琼脂糖凝胶的浓度为1%-1.5%。
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