[发明专利]一种高纯度多拉菌素的制备方法

权利要求书

1.一种高纯度多拉菌素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将多拉菌素发酵液过滤，得到菌渣；

2)向所得菌渣中加入极性溶剂，萃取，过滤，得到滤液；所述极性溶剂选自甲醇、乙醇；

3)调整步骤2)所得滤液中极性溶剂和水的浓度，使滤液中所述极性溶剂的浓度为70-73％；过滤；

4)将步骤3)所得滤液通过超滤膜进行超滤，得到超滤液；

5)将步骤4)所得超滤液进入逆流萃取器与第一溶剂进行萃取交换；所述第一溶剂选自甲苯、对二甲苯；

6)将步骤5)进行第一次逆流萃取交换后的超滤液再次进入逆流萃取器与第二溶剂进行萃取交换；所述第二溶剂为正庚烷和二氯甲烷的混合液，其中正庚烷与二氯甲烷的体积比例为1:3-1:1；

7)将步骤6)所得萃取液浓缩到晶体析出，降温、养晶、过滤得到晶体；

8)将步骤7)所得晶体用丙酮溶解，滴加纯化水，降温、析晶、分离得到潮晶；

9)将所得潮晶真空减压干燥，即得到高纯度的多拉菌素结晶粉。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)所述极性溶剂为浓度75-80％甲醇溶液或乙醇溶液。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，以g/mL计，菌渣干重与浓度75-80％甲醇溶液或乙醇溶液的重量体积比为1:5-7。

4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤3)所用过滤介质的孔径≤0.22um；和/或，步骤4)所述超滤膜的孔径为6000-5000道尔顿。

5.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤5)所述第一溶剂的用量为所述超滤液体积的1/3-1/2。

6.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤6)所述第二溶剂的用量为所述超滤液体积的1/4-1/2。

7.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤7)所述浓缩温度为40-45℃，和/或，结晶温度为10℃-20℃，和/或，养晶时间为6-8小时。

8.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤8)中，以g/mL计，潮晶与丙酮的重量体积比为1:4-5；和/或，所加入纯化水的量为丙酮体积的2.5-3倍。

9.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将多拉菌素发酵液过滤，得到菌渣；

2)向所得菌渣中加入浓度75-80％甲醇溶液；萃取，过滤，得到滤液；以g/mL计，菌渣干重与浓度75-80％甲醇溶液的重量体积比为1:5-7；

3)调整步骤2)所得滤液中极性溶剂和水的浓度，使滤液中所述极性溶剂的浓度为70-73％；过滤；所用过滤介质的孔径≤0.22um；

4)将步骤3)所得滤液通过孔径为6000-5000道尔顿的超滤膜进行超滤，得到超滤液；

5)将步骤4)所得超滤液进入逆流萃取器与甲苯进行萃取交换；甲苯用量为超滤液体积的1/3-1/2；

6)将步骤5)进行第一次逆流萃取交换后的超滤液再次进入逆流萃取器与第二溶剂进行萃取交换；所述第二溶剂为正庚烷和二氯甲烷的混合液，其中正庚烷与二氯甲烷的体积比例为1:3-1:1；所述第二溶剂的用量为超滤液体积的1/4-1/2；

7)将步骤6)所得萃取液浓缩到晶体析出，降温、养晶、过滤得到晶体；所述浓缩温度为40-45℃，和/或，结晶温度为10℃-20℃，和/或，养晶时间为6-8小时；

8)将步骤7)所得晶体用丙酮溶解，滴加纯化水，降温、析晶、分离得到潮晶；以g/mL计，潮晶与丙酮的重量体积比为1:4-5；和/或，所加入纯化水的量为丙酮体积的2.5-3倍；

9)将所得潮晶真空减压干燥，即得到高纯度的多拉菌素结晶粉。