[发明专利]用于检测CEBPA基因突变的引物及检测方法在审
| 申请号： | 201711185646.1 | 申请日： | 2017-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN107841538A | 公开（公告）日： | 2018-03-27 |
| 发明（设计）人： | 常中宝;韩久伟;张明亮;李强;董欢欢;黄正宇 | 申请（专利权）人： | 合肥金域医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都行之专利代理事务所(普通合伙)51220 | 代理人： | 胡晓丽 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥市高新*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 cebpa 基因突变 引物 方法 | ||
1.用于检测CEBPA基因突变的引物，其特征在于，所述引物的上游引物如SEQ ID NO.1所示，下游引物如SEQ ID NO.2所示。
2.用于检测CEBPA基因突变的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物。
3.用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，包含以下步骤：
步骤1，取待测样品DNA；
步骤2，采用包括权利要求1所述引物的试剂盒，以步骤1所述的DNA为模板，进行PCR扩增反应；
步骤3，采用PCR扩增产物进行测序反应；
步骤4，测序反应产物经纯化、变性后，上测序仪测序；
步骤5，对测序峰图进行分析，并与CEBPA基因突变类型进行识别。
4.根据权利要求3所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述引物的上游引物和下游引物的浓度均为2.5μL。
5.根据权利要求3所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述PCR扩增反应步骤依次包括：
步骤(1)预变性；步骤(2)变性；步骤(3)退火；步骤(4)延伸；步骤(5)延伸；步骤(6)保存。
6.根据权利要求5所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述步骤(1)预变性温度为95℃，时间为10min。
7.根据权利要求5所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述步骤(2)变性温度为95℃，时间为30s；步骤(3)退火温度为60℃，时间为30s；步骤(4)延伸温度为72℃，时间为1min。
8.根据权利要求5所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述步骤(5)延伸温度为72℃，时间为7min。
9.根据权利要求3所述的用于检测CEBPA基因突变的方法，其特征在于，所述步骤3和步骤4采用Sanger测序法检测。
10.基于权利要求1所述的引物在检测CEBPA基因突变中的应用。
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