[发明专利]锈色棕榈象甲特异性引物及快速分子检测方法有效
申请号: | 201711173881.7 | 申请日: | 2017-11-22 |
公开(公告)号: | CN107904315B | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 宗世祥;陶静;骆有庆;任利利;阎伟 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;陈征 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 棕榈 特异性 引物 快速 分子 检测 方法 | ||
1.锈色棕榈象甲PCR鉴定用的特异性引物,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2,或SEQ ID NO.3-4所示。
2.锈色棕榈象甲PCR鉴定用的特异性引物组合,其特征在于,含有2对特异性引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2和SEQ ID NO.3-4所示。
3.权利要求1所述的特异性引物或权利要求2所述的特异性引物组合在鉴定锈色棕榈象甲中的应用。
4.一种锈色棕榈象甲的快速分子检测方法,该方法以样品总DNA为模板,利用权利要求1所述的特异性引物进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳判定结果,当以SEQ IDNO.1-2所示的引物进行PCR扩增时,若扩增产物为458bp,则待测样品来自锈色棕榈象甲;或当以SEQ ID NO.3-4所示的引物进行PCR扩增时,若扩增产物为454bp,则待测样品来自锈色棕榈象甲。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,25μL PCR反应体系为:
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR的反应条件为:94℃预变性2min;再经94℃变性30s,53℃退火45s,72℃延伸2min,30个循环;最后72℃延伸10min。
7.如权利要求4-6任一所述的方法,其特征在于,样品总DNA来自锈色棕榈象甲的去头和鞘翅的成虫,或者来自幼虫的腹部组织。
8.一种锈色棕榈象甲鉴定用试剂盒,其特征在于,含有权利要求1所述的特异性引物。
9.一种锈色棕榈象甲鉴定用试剂盒,其特征在于,含有权利要求2所述的特异性引物组合。
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