[发明专利]锈色棕榈象甲特异性引物及快速分子检测方法有效

专利信息
申请号: 201711173881.7 申请日: 2017-11-22
公开(公告)号: CN107904315B 公开(公告)日: 2021-01-15
发明(设计)人: 宗世祥;陶静;骆有庆;任利利;阎伟 申请(专利权)人: 北京林业大学
主分类号: C12Q1/6888 分类号: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;陈征
地址: 100083 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 棕榈 特异性 引物 快速 分子 检测 方法
【权利要求书】:

1.锈色棕榈象甲PCR鉴定用的特异性引物,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2,或SEQ ID NO.3-4所示。

2.锈色棕榈象甲PCR鉴定用的特异性引物组合,其特征在于,含有2对特异性引物对,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2和SEQ ID NO.3-4所示。

3.权利要求1所述的特异性引物或权利要求2所述的特异性引物组合在鉴定锈色棕榈象甲中的应用。

4.一种锈色棕榈象甲的快速分子检测方法,该方法以样品总DNA为模板,利用权利要求1所述的特异性引物进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖凝胶电泳判定结果,当以SEQ IDNO.1-2所示的引物进行PCR扩增时,若扩增产物为458bp,则待测样品来自锈色棕榈象甲;或当以SEQ ID NO.3-4所示的引物进行PCR扩增时,若扩增产物为454bp,则待测样品来自锈色棕榈象甲。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,25μL PCR反应体系为:

6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR的反应条件为:94℃预变性2min;再经94℃变性30s,53℃退火45s,72℃延伸2min,30个循环;最后72℃延伸10min。

7.如权利要求4-6任一所述的方法,其特征在于,样品总DNA来自锈色棕榈象甲的去头和鞘翅的成虫,或者来自幼虫的腹部组织。

8.一种锈色棕榈象甲鉴定用试剂盒,其特征在于,含有权利要求1所述的特异性引物。

9.一种锈色棕榈象甲鉴定用试剂盒,其特征在于,含有权利要求2所述的特异性引物组合。

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