[发明专利]一种即用型多探针杂交玻片及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，由探针附着玻片、各探针、杂交缓冲液和样本附着玻片组成；所述探针附着玻片上包含若干个相互独立的探针附着区，各探针以冻干的形式分别附着在各相互独立的探针附着区上；所述样品附着玻片上包含若干个相互独立的样品附着区，样品附着区与探针附着区一一对应，样品滴加在样品附着区上，当样本附着区与探针附着区贴合时，样品附着区的样品与相对应的探针附着区的探针实现杂交结合。

2.根据权利要求1所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述探针附着玻片由探针信息标识区、探针附着区域和杂交玻片接合区组成，所述探针信息标识区上记录了每个独立的探针附着区上对应的探针种类，所述探针附着区域内包含若干个相互独立的探针附着区，探针以冻干的形式附着在探针附着区上，所述杂交玻片接合区的表面附有丙烯酸脂胶水，用于探针附着玻片的包装封膜以及和样本附着玻片的粘结。

3.根据权利要求2所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述探针附着区域为一凹槽，凹槽内含若干个相互独立的探针附着小区块，每个独立的探针附着小区块由探针附着区和外围隔离区组成；每个独立的探针附着小区块之间存在隔离小沟。

4.根据权利要求1所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述样本附着玻片由样品信息记录区、样品附着区和样品隔离区组成，所述样品信息记录区上记录了样本信息，样品滴加在样品附着区上，所述样品隔离区用于防止样品交叉污染。

5.根据权利要求4所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述样品附着区采用亲水材质；所述样品隔离区附有疏水涂层。

6.根据权利要求1所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述杂交缓冲液的组分为：10wt%碳酸亚乙酯、30wt%硫酸葡聚糖、1ugRNaseA、0.6M氯化钠、10mM柠檬酸缓冲液。

7.根据权利要求1所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，所述各探针为FISH基因位点探针或FISH基因着丝粒/端粒探针。

8.根据权利要求7所述即用型多探针杂交玻片试剂盒，其特征在于，各探针选自如下组合A或组合B：

组合A：BCR/ABL，IGH/BCL2，AML/ETO；

组合B：PML/RARA，BCR/ABL，P53，D13S319，1Q21，IGH/BCL2，CBFB，AML/ETO。

9.权利要求1~8任一所述即用型多探针杂交玻片的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）制备附着有各探针的探针附着玻片：

a．制备具有权利要求1~8任一所述结构的探针附着玻片；

b．使用去离子水配制赋形剂，所述赋形剂的配方为：左旋糖苷0.5wt%、阿拉伯胶树

3wt%、甘露醇1wt%、聚丙烯酸酯0.3wt%；

c．分别配制各探针溶液，将各探针溶液分别与赋形剂混合均匀，分别滴加并均匀涂抹在探针附着玻片上每个独立的探针附着区上；然后将探针附着玻片冻干、封膜，制备得到附着有各探针的探针附着玻片；

（2）制备具有权利要求1~8任一所述结构的样本附着玻片；

（3）配制杂交缓冲液；由制备所得附着有各探针的探针附着玻片、杂交缓冲液和样本附着玻片组成即用型多探针杂交玻片。

10.权利要求1~8任一所述即用型多探针杂交玻片的应用，具体包括如下步骤：

（1）样本处理：将样本分别滴加到样本附着玻片的各样品附着区，经预处理后，备用；

（2）探针样本共変性：分别向探针附着玻片上各相互独立的探针附着区滴加杂交缓冲液，并将样本附着玻片倒扣在探针附着玻片上，使样本附着区与探针附着区贴合在一起，贴合后将整个探针附着玻片与样本附着玻片一起反转，置于金属浴73℃变性5min，变形完成后再置于37℃湿盒杂交1h；

（3）杂交后洗涤：待杂交完成后移去探针附着玻片，将样本附着玻片洗涤后室温晾干；

（4）复染及镜检：向晾干的样本附着玻片的样品附着区滴加抗淬灭封片剂，使用盖破片封片并在荧光显微镜下观察杂交结果。