[发明专利]一种抗MRSA萘类化合物及其制备方法

权利要求书

1.一种抗MRSA萘类化合物的制备方法，其具有下式所示结构：

命名为 naphthalde B；所述的制备方法是以福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）发酵产物为原料，经有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤得到；所述福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株保藏编号为CCTCC M 2017632，保藏日期为2017年10月23日；

A、福士拟茎点霉（Phomopsis fukushii）菌株的发酵方法包括斜面、种子液制备和固体放大发酵，具体步骤为：

（1）斜面固体培养基为：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂20g/L，pH值6.5，121℃，25min灭菌，冷却至60℃倒斜面备用；将福士拟茎点霉菌株CCTCC M 2017632置于斜面固体培养基中保存备用；

（2）液体种子培养基为：NaNO₃ 2g/L，K₂HPO₄ 1g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5g/L，KCL 0.5g/L，FeSO₄·7H₂O 0.01g/L，葡萄糖20g/L，pH值6.5，装入250mL锥形瓶，100mL/瓶，121℃，25min灭菌备用；将保存备用的福士拟茎点霉菌株CCTCC M 2017632斜面转接到液体种子培养基中，摇床上28℃培养24h，转速为180r/min，得拟茎点霉菌种子液；

（3）大米固体培养基为：大米100g，珍珠岩20g，蒸馏水100ml,装入600mL组培瓶，121℃，25min灭菌备用；取步骤（2）所得拟茎点霉菌种子液，按培养基质量比2%接入大米固体培养基中进行固体发酵，发酵条件为：25~32℃，发酵30~60天，得到发酵产物；

B、有机溶剂萃取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离步骤具体为：

（1）有机溶剂萃取：以60~80%的乙醇为溶剂，超声提取2~4次，每次4~8h，将提取液合并、过滤，减压浓缩成浸膏；

（2）硅胶柱层析：将浸膏用重量比1.5~3倍量的纯甲醇溶解，用浸膏重量1~3倍的200-300目硅胶拌样后上硅胶柱，以体积配比为1:0~0:1的氯仿-甲醇溶液梯度洗涤，分别收集各部分的洗脱液并浓缩，用TLC监测合并相同的部分；

（3）高压液相色谱分离：取体积配比7:3的氯仿-甲醇溶液洗脱液，以40~50%的甲醇为流动相，以规格为20mm×250mm、5μm的C₁₈制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为238nm，每次进样50~200μL，收集10~20min的色谱峰，多次累加后蒸干，得到naphthalde B。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述步骤B、（2）中所述氯仿-甲醇溶液的体积配比为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、3:2、1:1、1:2、0:1。