[发明专利]一种黄牛ACVR1基因插入/缺失的检测方法及其应用有效
| 申请号： | 201711014547.7 | 申请日： | 2017-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN107641657B | 公开（公告）日： | 2020-05-29 |
| 发明（设计）人： | 陈宏;程杰;曹修凯;马云;白跃宇;蓝贤勇;雷初朝;胡沈荣 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6858 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 范巍 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 黄牛 acvr1 基因 插入 缺失 检测 方法 及其 应用 | ||
1.一种黄牛ACVR1基因插入/缺失的检测方法在黄牛分子标记辅助选择育种中的应用，其特征在于：所述的黄牛ACVR1基因插入/缺失的检测方法，包括以下步骤：
以待测黄牛基因组DNA为模板，以引物对P1为引物，通过PCR扩增待测黄牛ACVR1基因的部分片段；对PCR扩增得到的片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据电泳结果鉴定待测黄牛ACVR1基因16-bp插入/缺失多态位点的基因型；
所述引物对P1为：
上游引物：5’-CACGGAAGAGACAGACCAGTATT-3’；
下游引物：5’-TGGGGGAGAGTTCCATCTGTTT-3’；
所述插入/缺失多态位点的基因型为：插入/插入基因型表现为166bp一条带纹；插入/缺失基因型表现为166bp和150bp两条带纹；缺失/缺失基因型表现为150bp一条带纹；
所述的在黄牛分子标记辅助选择育种中的应用是指插入/缺失多态位点的缺失/缺失基因型作为黄牛胸围和管围指数的DNA标记。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系包括10pmol/μL上游引物0.3～1μL、10pmol/μL下游引物0.3～1μL及50ng/μL模板DNA0.3～1μL。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述PCR扩增的反应程序包括以下步骤：95℃预变性5min；94℃变性30s，59.1℃复性30s，72℃延伸30s；共36个循环；72℃延伸10min。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述琼脂糖凝胶电泳采用的琼脂糖凝胶的质量浓度为3.5％。
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