[发明专利]一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的分子标记引物及方法

权利要求书

1. 一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述过程为：将提取所得DNA序列与分子标记SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4比对，分子标记SEQ ID NO.3为：CAGGCATGGTGGGCACCGCCCTGAGCTTGCTGATCCGAGCAGAACTTAGCCAACCCGGCGCTCTACTTGGAGACGATCAAATTTACAACGTCATTGTTACGGCACACGCCTTTGTAATAATTTTCTTTATAGTAATACCAATTCTAATTGGAGGCTTTGGGAACTGACTAGTTCCGCTTATGATCGGAGCCCCTGACATGGCATTCCCTCGAATGAATAACATGAGCTTCTGACTCCTGCCCCCTTCTTTCCTTCTCCTCTT；分子标记SEQ ID NO.4为：CAGGCATAGTGGGCACGGCCCTAAGCCTGCTAATCCGAGCAGAACTCAGCCAACCCGGCGCTCTGCTTGGTGATGACCAGATCTATAATGTTATCGTTACTGCACATGCCTTTGTAATGATTTTCTTTATAGTAATACCAATTTTAATCGGTGGCTTCGGAAACTGATTAGTTCCGCTAATGATCGGGGCGCCCGATATGGCATTCCCCCGGATAAATAATATGAGCTTCTGGCTTTTACCCCCTTCTTTCCTACTCCTCTT。

2.根据权利要求1所述的一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述分子标记的获取方法为：用标准酚-氯仿法提取阿拉伯鱚基因组总DNA和印度鱚基因组总DNA，以总DNA为模板，以引物进行PCR扩增，对扩增结果进行纯化、测序。

3. 根据权利要求2所述的一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述PCR扩增反应过程为：将2.5μL 10×buffer、2μL dNTPs、0.15uL rTaq酶、1μL上游引物、1μL下游引物、1μL模板DNA混合，再加入17.5μL灭菌水，将混合物在94℃预变性5min，然后94℃变性45s，50℃退火45s，72℃延伸45s，进行35个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存∞。

4.根据权利要求2所述的一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述上游引物序列为：5’-TTTAGTATTCGGAGCCTGAG-3’；下游引物序列为：5’-CCTCAACACCTGATGAGGCC-3’。

5.根据权利要求1所述的一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述DNA提取过程为：用标准酚-氯仿法提取阿拉伯鱚基因组总DNA和印度鱚基因组总DNA，以总DNA为模板，以引物进行PCR扩增，对扩增结果进行纯化、测序。

6. 根据权利要求5所述的一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的方法，其特征在于：所述PCR扩增反应过程为：将2.5μL 10×buffer、2μL dNTPs、0.15uL rTaq酶、1μL上游引物、1μL下游引物、1μL模板DNA混合，再加入17.5μL灭菌水，将混合物在94℃预变性5min，然后94℃变性45s，50℃退火45s，72℃延伸45s，进行35个循环，最后72℃延伸10min，4℃保存∞，所述上游引物序列为：5’-TTTAGTATTCGGAGCCTGAG-3’；下游引物序列为：5’-CCTCAACACCTGATGAGGCC-3’。

7.一种鉴别阿拉伯鱚与印度鱚的分子标记引物，其特征在于：所述上游引物序列为：5’-TTTAGTATTCGGAGCCTGAG-3’；下游引物序列为：5’-CCTCAACACCTGATGAGGCC-3’。