[发明专利]一株马克斯克鲁维酵母菌及其生产β-葡萄糖苷酶的方法

权利要求书

1. 一株马克斯克鲁维酵母菌（Kluyveromyces marxianus），它的保藏编号为CGMCCNo.13907。

2.β-葡萄糖苷酶的生产方法，它包括：

1）将马克斯克鲁维酵母菌，在基础培养基中活化3代，挑取已活化的该菌种接种到基础培养基中，在摇床中培养，温度为25-35℃，时间10-15h；离心，洗涤，再重悬，使菌悬液浓度调整到10⁷cfu/mL，即为β-葡萄糖苷酶发酵剂；

2）步骤1）中的β-葡萄糖苷酶发酵剂按质量百分比5-15%接种到发酵培养基上；摇床中发酵，温度为35-37℃，转速为100-130r/min；取发酵后的发酵液，冷冻离心15-25min，收集上清液，得到β-葡萄糖苷酶粗酶液；

3）取步骤2）中的β-葡萄糖苷酶粗酶液25-35mL，加入硫酸铵，于4℃冰箱静置，8500-9500r/min离心15-30min，将沉淀用缓冲液复溶，透析；将酶液上样于Sephadex G-75柱子，洗脱，收集含有β-葡萄糖苷酶的洗脱峰混合；再上样于DEAE Cellulose52弱阴离子交换柱，洗脱，收集含有β-葡萄糖苷酶的组分，对纯化酶进行再脱盐，真空冷冻干燥，得到β-葡萄糖苷酶酶粉；

所述的马克斯克鲁维酵母菌，它的保藏编号为CGMCC No.13907。

3. 根据权利要求2所述的β-葡萄糖苷酶的生产方法，其特征在于：步骤2）中所述的发酵培养基为水分含量为80-99%的豆渣； 121℃灭菌20min。

4. 根据权利要求3所述的β-葡萄糖苷酶的生产方法，其特征在于：步骤1）中所述的基础培养基的组份为：牛肉浸粉8g/L、蛋白胨10g/L、酵母浸粉4g/L、葡萄糖20g/L、磷酸氢二钾2g/L、柠檬酸氢二铵2g/L、乙酸钠5g/L、硫酸镁0.2g/L、硫酸锰0.04g/L、吐温80 1g/L、去离子水1000mL、pH5.7±0.2。

5. 根据权利要求4所述的β-葡萄糖苷酶的生产方法，其特征在于：步骤2）中所述的发酵温度35℃，转速120 r/min，离心20min。

6.根据权利要求5所述的β-葡萄糖苷酶的生产方法，其特征在于：步骤3）中所述的离心转速为9000 r/min，时间为20min。