[发明专利]大肠杆菌培养基及其制备方法有效
申请号: | 201710861569.0 | 申请日: | 2017-09-21 |
公开(公告)号: | CN108018227B | 公开(公告)日: | 2020-10-27 |
发明(设计)人: | 涂桂洪;邓惠平;潘忠林;谭志康 | 申请(专利权)人: | 广州市金因源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/19 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510670 广东省广州市高新技术产业开*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 大肠杆菌 培养基 及其 制备 方法 | ||
1.一种大肠杆菌培养基,其特征在于,由以下重量百分比的原料制备而成:
鸡蛋液10-15%;蛋白酶组合物A 0.7-8%;蛋白组合物B 0.8-1.5%;糖类组合物C 0.01-0.03%;余量为去离子水;
所述蛋白组合物B包括黄豆粉、绿豆粉、赤豆的至少一种;
所述蛋白酶组合物A包括蛋白酶、木瓜皮的至少一种;
所述糖类组合物C包括葡萄糖、麦芽糖、蔗糖的至少一种;
所述大肠杆菌培养基的制备方法,包括以下步骤:
按所述大肠杆菌培养基的原料配比称取各原料;
将所述鸡蛋液、蛋白酶组合物A、蛋白组合物B和去离子水混合,于50-60℃保温6-10h,得混合物;
将所述混合物煮沸,沉淀,过滤,得大肠杆菌培养基清液;
向所述大肠杆菌培养基清液加入糖类组合物C,用去离子水定容;
调节定容后的所述大肠杆菌培养基清液的pH值为6.8-7.2;
将调节pH值后的所述大肠杆菌清液蒸汽灭菌20-40min,即得所述大肠杆菌培养基。
2.根据权利要求1所述的大肠杆菌培养基,其特征在于,由以下原料组成:
鸡蛋液12-15%;蛋白酶组合物A 1-8%;蛋白组合物B 1-1.5%;糖类组合物C 0.01-0.025%;余量为去离子水。
3.根据权利要求1所述的大肠杆菌培养基,其特征在于,由以下原料组成:
鸡蛋液15%;蛋白酶组合物A 8%;蛋白组合物B 1.2%;糖类组合物C 0.025%;余量为去离子水。
4.根据权利要求1-3任一项所述的大肠杆菌培养基,其特征在于,所述蛋白酶组合物A为蛋白酶。
5.根据权利要求1-3任一项所述的大肠杆菌培养基,其特征在于,所述蛋白组合物B为黄豆粉。
6.根据权利要求1-3任一项所述的大肠杆菌培养基,其特征在于,所述糖类组合物C为葡萄糖。
7.一种大肠杆菌培养基的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
按权利要求1-3任一项所述大肠杆菌培养基的原料配比称取各原料;
将鸡蛋液、蛋白酶组合物A、蛋白组合物B和去离子水混合,于50-60℃保温6-10h,得混合物;
将所述混合物煮沸,沉淀,过滤,得大肠杆菌培养基清液;
向所述大肠杆菌培养基清液加入糖类组合物C,用去离子水定容;
调节定容后的所述大肠杆菌培养基清液的pH值为6.8-7.2;
将调节pH值后的所述大肠杆菌清液蒸汽灭菌20-40min,即得大肠杆菌培养基。
8.一种大肠杆菌的培养方法,其特征在,包括以下步骤:
种子液的制备:在无菌条件下,取大肠杆菌斜面,接种至权利要求1所述的大肠杆菌培养基中,在37℃、180-220rpm恒温摇床中培养10-14h,得种子培养液;
种子液的扩大培养:在无菌条件下,将所述种子培养液接种至权利要求1所述的大肠杆菌培养基中,在37℃、180-220rpm恒温摇床中培养10-14h,即得大肠杆菌菌液。
9.根据权利要求8所述的大肠杆菌培养方法,其特征在于,所述种子液扩大培养步骤中,接种量为所述大肠杆菌培养基体积总量的1.5-2%。
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