[发明专利]一种抗人DLL4单克隆抗体与海兔毒素衍生物MMAE的偶联物

权利要求书

1.一种新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：包括抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01分子偶联带有接头Val-Cit的毒素MMAE，即vc-MMAE，平均每个MMGZ01分子偶联MMAE的分子数为4.42。

2.根据权利要求1所述的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：

步骤一：抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01经过Protein A柱亲和层析纯化和琼葡糖凝胶G25 FF柱分子筛层析替换抗体溶液体系后，BCA法测定抗体浓度，将还原剂TCEP与抗体以3：1的摩尔比混合，还原MMGZ01，使MMGZ01链间二硫键打开，样品于4℃反应1小时，用含1M DTPA的PH 7.0PBS溶液通过琼葡糖G25 FF柱分子筛层析脱盐。

步骤二：取带有二肽接头Val-Cit的毒素MMAE粉末，即vc-MMAE充分溶解在DMSO溶液中，将vc-MMAE溶液与步骤一得到抗体产物以15∶1的摩尔比混合进行偶联反应，置于冰上轻轻搅拌，反应1小时。

步骤三：，使用琼葡糖凝胶G25FF脱盐柱将步骤二得到的产物MMGZ01-vcMMAE，即MvM03，进行分子筛层析纯化，除去反应体系中的杂质。

步骤四：在低速冷冻离心机上用超滤管将步骤三中的产物MvM03进行浓缩，即得抗体药物偶联物MvM03；BCA法测定偶联物浓度后，置于-20℃保存。

3.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述的抗体药物偶联物MvM03的抗体部分采用化学方法，使用TCEP还原剂将链间二硫键还原成巯基基团，从而对抗体结构进行修饰。

4.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述步骤一中，MMGZ01与还原剂TCEP的摩尔比为1∶3。

5.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：通过上述方法制备出的抗体药物偶联物MvM03具备以下特征：裸抗组分低于10％，单体含量大于90％。

6.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述步骤一和步骤三中，所述的纯化包含亲和层析柱、脱盐柱以及超滤换液系统。

7.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述步骤一和步骤三中，所述的亲和层析柱是Protein A柱亲和层析柱。

8.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述步骤一和步骤三中，所述的脱盐柱为琼葡糖凝胶G25FF脱盐柱。

9.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：所述的抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与所述的vcMMAE的偶联比为4.42。

10.根据权利要求2所述的新型抗人DLL4单克隆抗体MMGZ01与海兔毒素衍生物MMAE的抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：通过上述方法制备出的抗体药物偶联物MvM03被应用于治疗靶向人DLL4肿瘤药物中。

11.根据权利要求4所述抗体药物偶联物MvM03，其特征在于：在制备用于治疗乳腺癌药物中的应用。