[发明专利]一种糖苷酶组合物及酶法制备淫羊藿苷元的方法有效
申请号: | 201710448315.6 | 申请日: | 2017-06-14 |
公开(公告)号: | CN107641621B | 公开(公告)日: | 2021-07-23 |
发明(设计)人: | 萧伟;赵林果;葛林;丁岗;裴建军;王振中 | 申请(专利权)人: | 江苏康缘药业股份有限公司;南京林业大学 |
主分类号: | C12N9/24 | 分类号: | C12N9/24;C12N9/42;C12P17/06 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 222047 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖苷酶 组合 法制 淫羊藿 方法 | ||
1.一种酶法制备淫羊藿苷元的方法,其特征在于,以糖苷酶组合物对淫羊藿苷进行酶解;所述糖苷酶组合物由α-L-鼠李糖苷酶和β-葡萄糖苷酶组成;所述α-L-鼠李糖苷酶源自Aspergillus terreus CCF 3059;所述β-葡萄糖苷酶源自Thermotoga thermarum DSM5069GH3家族;
所述酶解的条件为:淫羊藿苷与α-L-鼠李糖苷酶于50℃~70℃反应1h~12h后,再与β-葡萄糖苷酶于75℃~95℃反应1h~6h;
所述酶解的缓冲液为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液;
所述酶解体系中:
淫羊藿苷的浓度为0.2~1g/L;
α-L-鼠李糖苷酶的浓度为100U/mL~600U/mL;
β-葡萄糖苷酶的浓度为0.2U/mL~1U/mL。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶解后经过大孔树脂纯化。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述大孔树脂纯化包括:以大孔树脂吸附酶解产物后,用水洗至无色后依次用20vol%、40vol%、60vol%、80vol%的乙醇水溶液洗两个柱体积,然后用100%乙醇洗至无色,将100%乙醇洗脱液浓缩、干燥获得淫羊藿苷元。
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