[发明专利]一种反义长链非编码RNA在制备基因治疗剂方面的应用在审
申请号: | 201710415730.1 | 申请日: | 2017-06-02 |
公开(公告)号: | CN107058581A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 李华玲;崔恒宓;袁君婷;吕贝;胡莉娟;吴奕帆;盛雅婷 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;A61K45/00;A61P35/00 |
代理公司: | 北京中济纬天专利代理有限公司11429 | 代理人: | 杨乐 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 反义 长链非 编码 rna 制备 基因治疗 方面 应用 | ||
1.一种试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括MEF2D基因的正、反义特异性引物:5′-TTACCAGTTGACCAGTGCAG-3′和5′-TTGCCAGGCAGTGACATT-3′。
2.权利要求1所述的MEF2D基因的正、反义特异性引物在制备检测肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量试剂盒中的应用。
3.一种检测肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量的方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)设计合成MEF2D基因的正、反义特异性引物:5′-TTACCAGTTGACCAGTGCAG-3′和5′-TTGCCAGGCAGTGACATT-3′;
(2)总RNA的提取;
(3)以步骤(1)设计的特异性引物对步骤(2)得到的RNA进行特异性逆转录,而后进行PCR,PCR条件为94℃5min变性;94℃30s,60℃30s,72℃40s(40个循环);72℃5min延伸;
(4)步骤(3)的PCR结果采用GraphPad Prism 5软件进行分析得到肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量。
4.MEF2D-AS在制备以MEF2D-AS为靶点的药物中的用途。
5.MEF2D-AS在制备药物中的用途,其特征在于所述药物的作用靶点为MEF2D-AS,具体是通过提高MEF2D-AS的表达,下调MEF2D的表达,来发挥作用的。
6.一种DNA甲基化酶抑制剂在制备治疗肝癌药物中的应用,其特征在于所述DNA甲基化酶抑制剂是通过提高MEF2D-AS的表达,从而下调癌相关基因MEF2D,进而抑制肝癌细胞增殖,来发挥作用的。
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