[发明专利]一种反义长链非编码RNA在制备基因治疗剂方面的应用在审

专利信息
申请号: 201710415730.1 申请日: 2017-06-02
公开(公告)号: CN107058581A 公开(公告)日: 2017-08-18
发明(设计)人: 李华玲;崔恒宓;袁君婷;吕贝;胡莉娟;吴奕帆;盛雅婷 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11;A61K45/00;A61P35/00
代理公司: 北京中济纬天专利代理有限公司11429 代理人: 杨乐
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 反义 长链非 编码 rna 制备 基因治疗 方面 应用
【权利要求书】:

1.一种试剂盒,其特征在于所述试剂盒包括MEF2D基因的正、反义特异性引物:5′-TTACCAGTTGACCAGTGCAG-3′和5′-TTGCCAGGCAGTGACATT-3′。

2.权利要求1所述的MEF2D基因的正、反义特异性引物在制备检测肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量试剂盒中的应用。

3.一种检测肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量的方法,其特征在于包括如下步骤:

(1)设计合成MEF2D基因的正、反义特异性引物:5′-TTACCAGTTGACCAGTGCAG-3′和5′-TTGCCAGGCAGTGACATT-3′;

(2)总RNA的提取;

(3)以步骤(1)设计的特异性引物对步骤(2)得到的RNA进行特异性逆转录,而后进行PCR,PCR条件为94℃5min变性;94℃30s,60℃30s,72℃40s(40个循环);72℃5min延伸;

(4)步骤(3)的PCR结果采用GraphPad Prism 5软件进行分析得到肝癌细胞HepG2中MEF2D-AS表达量。

4.MEF2D-AS在制备以MEF2D-AS为靶点的药物中的用途。

5.MEF2D-AS在制备药物中的用途,其特征在于所述药物的作用靶点为MEF2D-AS,具体是通过提高MEF2D-AS的表达,下调MEF2D的表达,来发挥作用的。

6.一种DNA甲基化酶抑制剂在制备治疗肝癌药物中的应用,其特征在于所述DNA甲基化酶抑制剂是通过提高MEF2D-AS的表达,从而下调癌相关基因MEF2D,进而抑制肝癌细胞增殖,来发挥作用的。

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