[发明专利]利用金针菇制备降血糖肽的方法

说明书

本发明公开了一种利用金针菇制备降血糖肽的方法，包括以下步骤：将金针菇干粉与质量浓度为0.4％～0.6％的氢氧化钠水溶液混合后水浴，调节上清液pH值至4±0.5后冷冻离心，得沉淀；在沉淀中加水、中性蛋白酶后于震荡条件进行酶解反应，所得的酶解反应产物于95～100℃保温10～15min，然后自然冷却至室温，离心，得酶解液；酶解液进行超滤处理，得到超滤酶解液；将超滤酶解液进行喷雾干燥，得金针菇降血糖肽粉。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种利用金针菇制备降血糖肽的方法。

背景技术

目前，糖尿病已成为继肿瘤、心血管疾病之后严重威胁人类健康的慢性病，是威胁人类健康的三大慢性疾病之一，餐后高血糖是糖尿病的主要风险因子，α－葡萄糖苷酶抑制剂能通过抑制小肠上皮绒毛膜刷状缘上α－葡萄糖苷酶的活性，减少食物中碳水化合物的消化，延缓葡萄糖的生成，在降低餐后血糖中具有重要作用。目前用于临床治疗的α-葡萄糖苷酶抑制剂，多为化学合成，长期使用对人体能产生一定的副作用，如损害肝脏，导致胃肠气胀和肠功能紊乱等。

生物活性肽是源于蛋白质的多功能化合物，在生命活动中起着重要的调节作用，有促进免疫、激素调节、抗菌、抗病毒、抗氧化、降血压、降血脂、降血糖等作用，并具有易消化、安全性高的特点，是极具发展前景的功能因子。从天然蛋白中提取制备具有营养性和生理活性的功能肽，能够有效的提高富含蛋白的食品及农产品附加值。

金针菇不仅味道鲜美，同时具有一定的保健功能，经常食用可以提高智力，抗疲劳，抗菌消炎等作用。金针菇富含锌、钾，钾可以控制血糖的升高，锌可以增加胰岛素原转化为胰岛素的能力，加强机体对葡萄糖的利用，抑制血糖的升高。金针菇也可抑制血脂升高，降低胆固醇，防治糖尿病心脑血管疾病，降低糖尿病并发疾病的发病率。

我国是金针菇生产和消费大国，随着金针菇工厂化生产的普及，金针菇的产量增多，但金针菇深加工技术落后，缺乏高附加值的产品，不利于金针菇产业健康可持续发展。金针菇蛋白质含量高，氨基酸含量非常丰富，目前关于金针菇蛋白酶解制备生物活性肽的研究不多，有研究采用金针菇制备抗菌肽。

201610381719.3的发明《一种金针菇提取物及其制备方法与应用》告知了一种金针菇提取物的制备方法，金针菇以水提、醇沉制得金针菇提取物；该金针菇提取物中主要包括多糖、蛋白质、维生素和矿物质。经体外实验证明，该金针菇提取物能抑制体外α糖苷酶的活力。体内试验表明，金针菇提取物可以明显降低2型糖尿病大鼠的血糖，调节血脂代谢紊乱，改善胰岛素抵抗，降低血清游离脂肪酸水平，增加肝糖原、肌糖原储备，修复受损胰腺，有明显的治疗2型糖尿病作用。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种成本低、效果好的利用金针菇制备降血糖肽的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供一种利用金针菇制备降血糖肽的方法，包括以下步骤：

1)、将含水量≤15％的金针菇干粉(能过60目的筛)与质量浓度为0.4％～0.6％的氢氧化钠水溶液按1：11～13的重量比混合(金针菇干粉被溶解)后，50～70℃水浴1.5～2.5h，取上清液，调节上清液pH值至4±0.5；将调节pH值后的上清液冷冻离心，得沉淀(为金针菇蛋白沉淀)；

2)、将步骤1)所得的沉淀与水按照1:3～5的重量比混合后，调节pH值至7～7.5，然后升温至45～50℃，再加入沉淀重量1％的中性蛋白酶于震荡条件进行酶解反应，酶解温度为45～50℃，酶解反应时间为3～4h；

3)、将步骤2)所得的酶解反应产物于5～10min内升温至95～100℃，保温10～15min，然后自然冷却至室温，离心，得酶解液；

4)、将步骤3)所得的酶解液于0.1～0.2Mpa的工作压力和20～45℃的工作温度下，采用超滤膜进行超滤处理，得到超滤酶解液，所述超滤膜的截留分子量为3KDa；