[发明专利]检测黄曲霉毒素B1的适配体分子对、试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201710347257.8 | 申请日： | 2017-05-17 |
| 公开（公告）号： | CN107084961B | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 赵强;李亚飘;孙琳琳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生态环境研究中心 |
| 主分类号： | C12N15/115 | 分类号： | C12N15/115 |
| 代理公司： | 11021 中科专利商标代理有限责任公司 | 代理人： | 任岩 |
| 地址： | 100085*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 黄曲霉 毒素 b1 适配体 分子 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种检测黄曲霉毒素B1的适配体分子对，其特征在于，其是如下的分子对：
(1)序列如SEQ ID NO.1所示核酸分子的5’端经FAM标记得到的分子与序列如SEQ IDNO.4所示核酸分子的3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子组成的分子对；或
(2)序列如SEQ ID NO.1所示核酸分子的5’端经FAM标记得到的分子与序列如SEQ IDNO.5所示核酸分子的3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子组成的分子对；或
(3)序列如SEQ ID NO.2所示核酸分子的5’端经FAM标记得到的分子与序列如SEQ IDNO.6所示核酸分子的3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子组成的分子对；或
(4)序列如SEQ ID NO.2所示核酸分子的5’端经FAM标记得到的分子与序列如SEQ IDNO.7所示核酸分子的3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子组成的分子对；或
(5)序列如SEQ ID NO.3所示核酸分子的5’端经FAM标记得到的分子与序列如SEQ IDNO.8所示核酸分子的3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子组成的分子对。
2.一种检测黄曲霉毒素B1的试剂盒，其包括如权利要求1所述的适配体分子对。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性对照黄曲霉毒素B1。
4.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括pH为6～10的结合缓冲液。
5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述结合缓冲液的pH为7.5，包括10mMTris-HCl、50mM MgCl2、50mM NaCl和0.1％Tween20。
6.一种检测黄曲霉毒素B1的方法，其是将如权利要求1所述的适配体分子对与待测样本混合后温育，测定荧光强度值。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述适配体分子对的使用浓度为50～100nM。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，其中，5’端经FAM标记得到的分子的使用浓度为50nM，3’端经猝灭剂BHQ-1标记得到的分子的使用浓度为100nM。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述待测样本进行预处理，即将待测的样本采用结合缓冲溶液稀释。
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述温育的温度为2～8℃。
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述温育的温度为4℃。
12.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述温育是在pH为6～10的结合缓冲液中进行。
13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述结合缓冲液的pH为7.5，包括10mMTris-HCl、50mM MgCl2、50mM NaCl和0.1％Tween20。
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