[发明专利]一种重组转氨酶及其应用有效
申请号: | 201710288834.0 | 申请日: | 2017-04-27 |
公开(公告)号: | CN106995808B | 公开(公告)日: | 2019-06-04 |
发明(设计)人: | 石利平;陈峻青;龚仕荣;徐春涛;常斌;仲召亮;刘璇;庞小召;彭银城;何义;刘思琪 | 申请(专利权)人: | 宿迁阿尔法科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12N15/54;C12P13/00 |
代理公司: | 南京思拓知识产权代理事务所(普通合伙) 32288 | 代理人: | 吕鹏涛 |
地址: | 223800 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 重组 转氨酶 及其 应用 | ||
1.一种磷酸吡哆醛依赖的重组转氨酶突变体,其特征在于氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种编码权利要求1所述的重组转氨酶突变体的基因,其特征在于核苷酸序列如SEQID NO.1所示。
3.一种含有权利要求2所述的基因的表达载体。
4.根据权利要求3所述的表达载体,其特征在于表达载体系统为pET21a。
5.一种用于生产权利要求1所述的重组转氨酶突变体的基因工程菌,其特征在于所述基因工程菌中含有权利要求2所述的基因。
6.根据权利要求5所述的基因工程菌,其特征在于所述基因工程菌的宿主细胞为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21(DE3)。
7.一种权利要求1所述的重组转氨酶突变体的制备方法,其特征在于包括如下步骤:培养权利要求5~6中任一项所述的基因工程菌,获得重组表达的重组转氨酶突变体。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于所述方法包括在生产罐发酵条件下,进行工业化制备所述重组转氨酶突变体的步骤;所述的生产罐发酵条件:DO 35%以上,空气流量1:1.5 vvm。
9.权利要求1所述的重组转氨酶突变体作为催化剂在制备(R)-3-氨基-4-(2, 4, 5-三氟苯基)-丁酸甲酯中的应用。
10.一种合成(R)-3-氨基-4-(2, 4, 5-三氟苯基)-丁酸甲酯的方法,其特征在于在pH7.0~9.0的反应液中,在磷酸吡哆醛存在下,在权利要求1所述的重组转氨酶突变体作用下,以3-羰基- 4-(2, 4, 5-三氟苯基)-丁酸甲酯为底物不对称酶催化还原制备(R)-3-氨基-4-(2, 4, 5-三氟苯基)-丁酸甲酯。
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