[发明专利]一种酵母抽提水的质量控制方法及其应用

权利要求书

1.一种酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：是对酵母抽提水中的谷胱甘肽，总氮含量，氨基酸态氮的含量和氨基酸态氮的转化率，以及天冬氨酸和谷氨酸含量进行测定。

2.根据权利要求1所述的酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：所述的酵母抽提水指的是用酵母为原料，在冷冻冰晶化低温超微粉碎破壁后，或经酶解自溶后，再经分离提取后得到的产品。

3.根据权利要求1所述的酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：还包括对测定结果的判断标准；该判断标准如下：符合如下指标的酵母水提物为合格产品：谷胱甘肽的重量百分比含量≥0.08％、总氮的重量百分比含量≥1.5％、氨基酸态氮的重量百分比含量≥0.5％、氨基酸态氮转化率为25.0～55.0％、天冬氨酸的重量百分比含量≥0.2％且谷氨酸的重量百分比含量≤5.0％。

4.根据权利要求1所述的酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：

所述的谷胱甘肽通过HPLC方法测定；

所述的总氮含量通过凯氏定氮法测定；

所述的氨基酸态氮的含量通过甲醛滴定法进行测定。

5.根据权利要求4所述的酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：所述的HPLC方法的具体步骤如下：

(1)供试品溶液的制备：取酵母抽提水样品液，经孔径为0.2～0.48μm的微孔滤膜过滤，取过滤液作为供试品溶液，备用；

(2)对照品溶液的制备：取谷胱甘肽对照品30.73mg，精密称定，置10mL量瓶中，加入超纯水将谷胱甘肽对照品溶解后再用超纯水稀释至刻度，摇匀；该对照品溶液每1mL含谷胱甘肽对照品3.073mg，即得到浓度为10mmol/L的谷胱甘肽对照品溶液，备用；

(3)系统适用性：用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂，以体积比为96.3：3.7的三氟乙酸水溶液-乙腈为流动相，流速为每分钟0.6mL；柱温：25℃；蒸发光散射检测器检测；理论板数按酵母抽提水谷胱甘肽峰计算应不低于1500；

其中三氟乙酸水溶液的制备：取三氟乙酸1mL，置1000mL的量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀；

蒸发光散射检测器检测的检测参数：漂移管温度：90℃；氮气流速：1.5L/min；增益：1；模式：inpactor on；

(4)含量测定：分别精密吸取对照品溶液5μL、20μL，供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，得到谷胱甘肽的含量。

6.根据权利要求4所述的酵母抽提水的质量控制方法，其特征在于：所述的凯氏定氮法的步骤如下：

(A)样品消化：称取酵母抽提水样品2g，精密称定，小心转移到已干燥的凯氏烧瓶中，加入混合催化剂2.5g，缓缓加入浓硫酸20mL，摇匀，小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，再继续加热30min，得到消化液；其中混合催化剂为硒粉和硫酸钾按质量0.1:100的比例混合配制得到；浓硫酸是浓度为质量百分比98％的硫酸；

(B)样品蒸馏：待消化液冷却后，缓缓加入水250mL，摇匀，冷却，并加入小瓷片；连接凯氏烧瓶与蒸馏装置，馏出管的尖端插人盛有25mL硼酸溶液和4滴溴甲酚绿混合指示液的锥形瓶中，馏出管尖端应在液面之下；通过加液漏斗加入70mL氢氧化钠溶液于凯氏烧瓶中，轻轻摇匀，使内容物混匀，然后加热蒸馏；待馏出液达到180mL时，停止蒸馏；其中，硼酸溶液的配制步骤如下：称取硼酸3g，用水溶解，并定容至100mL，得到硼酸溶液；溴甲酚绿混合指示液的配制步骤如下：将1g/L溴甲酚绿乙醇溶液和1g/L甲基红乙醇溶液按体积比10:4混合即得；氢氧化钠溶液的配制步骤如下：称取氢氧化钠400g，溶于1L水中，静置，吸取上层清液于带橡皮塞的瓶内即得；

(C)含量测定：用0.1mol/L盐酸标准滴定溶液滴定馏出液，颜色由绿色消失转变为灰红色即为终点，记录消耗盐酸标准滴定溶液的毫升数；按上述操作同时进行空白试验；根据滴定测定结果计算总氮含量；其中，盐酸标准滴定溶液按GB/T601配制与标定。