[发明专利]一种猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201710184557.9 | 申请日： | 2017-03-24 |
| 公开（公告）号： | CN108619503A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 宋长绪;王磊;刘业兵;申翰钦;张乐宜;刘艳玲;梁鹏帅;张鹏飞;刘相聪 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | A61K39/12 | 分类号： | A61K39/12;A61K39/39;A61P31/20 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖;苏运贞 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 制备 基因工程亚单位疫苗 猪圆环病毒 圆环病毒 种猪 杆状病毒表达系统 应用 大肠杆菌 规模化生产 核衣壳蛋白 亚单位疫苗 缓冲溶液 免疫原性 疫苗抗原 致病性 中性PH 抗原 蛋白 克隆 成功 | ||
1.一种猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗，包含一种可溶性融合蛋白，其特征在于：所述的可溶性融合蛋白具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；或是具有通过突变、删除、插入或取代方式将如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中的至少1个氨基酸改变的序列。
2.根据权利要求1所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗，其特征在于：所述的可溶性融合蛋白是免疫活性成分，其来自于猪圆环病毒3型核衣壳蛋白。
3.根据权利要求1所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗，其特征在于：所述的可溶性融合蛋白来自于猪圆环病毒PCV3-China/GD2016病毒株。
4.根据权利要求1所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗，其特征在于：所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗还包括佐剂。
5.根据权利要求1所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗，其特征在于：编码所述的可溶性融合蛋白的核苷酸序列，如SEQ ID NO.2所示。
6.权利要求1～5任一项所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将编码所述的可溶性融合蛋白的核苷酸序列克隆入表达载体构建重组表达载体；将所述重组表达载体转入表达系统中进行表达，纯化，得到所述的猪圆环病毒基因工程亚单位疫苗。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述的表达系统为大肠杆菌、杆状病毒表达系统、真核哺乳动物细胞表达系统和植物表达系统中的一种或至少两种。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的构建重组表达载体的具体步骤为：针对编码所述的可溶性融合蛋白的核苷酸序列，通过设计引物进行PCR，将得到的PCV3-Cap基因片段双酶切后与表达载体连接构建得到重组表达载体。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述的引物为：
上游引物：5’-GGCGGATCCATGAGACACAGACCTATATTC-3’，
下游引物：5’-GGGCTCGAGGAGAACTGACTTGTAACGAAT-3’。
10.权利要求1所述的疫苗在预防和/或治疗猪圆环病毒III型引起的猪相关疾病中的应用。
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