[发明专利]一种促血小板生成素的融合蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种促血小板生成素的融合蛋白，包括人血清白蛋白HSA分子、促血小板生成素模拟肽TMP二联体，所述的HSA分子的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，编码所述HSA分子的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO：3所示，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，其特征在于，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体是由一个酵母偏好密码子编码而成的，编码所述促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO：1所示，该融合蛋白还包括可形成二聚体化结构域的肽段。

2.根据权利要求1所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段中含有至少两个半胱氨酸。

3.根据权利要求1所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段中含有两个半胱氨酸。

4.根据权利要求3所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的可形成二聚体化结构域的肽段为H肽段，其氨基酸序列如Seq ID No:8所示。

5.根据权利要求3所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，可形成二聚体化结构域的肽段为H肽段和选自fip结构域的肽段，H肽段的氨基酸序列如Seq ID No:8所示，选自fip结构域的肽段的氨基酸序列如Seq ID No:10所示。

6.根据权利要求4所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述HSA分子连接于融合蛋白的C-末端，结构式表示为HSA-L3-H-L4-TMP-L1-TMP，L1、L3、L4表示肽接头，L1的氨基酸序列为GGPSG，L3的氨基酸序列为GGGGSGL，L4的氨基酸序列为EFGGGGS，H表示可形成二聚体化结构域的H肽段。

7.根据权利要求5所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述HAS分子位于融合蛋白的N-末端，结构式表示为TMP-L1-TMP-L2-H-fip-HSA，L1和L2表示肽接头，L1的氨基酸序列为GGPSG，L2的氨基酸序列为GGGGSRS，H表示可形成二聚体化结构域的H肽段，fip表示选自fip结构域的肽段；所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示，编码所述融合蛋白的核苷酸序列的DNA序列如SEQ ID NO：5所示。

8.权利要求6所述的一种促血小板生成素的融合蛋白形成的二聚体化融合蛋白。

9.权利要求7所述的一种促血小板生成素的融合蛋白形成的二聚体化融合蛋白。

10.一种促血小板生成素的融合蛋白，包括人血清白蛋白HAS分子、促血小板生成素模拟肽TMP二联体，所述的人血清白蛋白HAS分子的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，编码所述HAS分子的氨基酸序列的DNA序列如SEQ IDNO：3所示，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，或该氨基酸序列经突变后具有同样功能的序列，其特征在于，所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体是由一个酵母偏好密码子编码而成的，编码所述的促血小板生成素模拟肽TMP二联体的氨基酸序列的DNA序列如SEQ ID NO：1所示，该融合蛋白还包括二聚体化结构域。

11.根据权利要求10所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的二聚体化结构域是通过二硫键的共价作用使促血小板生成素的融合蛋白二聚体化。

12.根据权利要求11所述的一种促血小板生成素的融合蛋白，其特征在于，所述的二聚体化结构域中含有至少两个由半胱氨酸形成的二硫键。