[发明专利]n‑3PUFA磷脂在改善慢性疲劳综合征制品中的应用

权利要求书

1.n-3PUFA磷脂在改善慢性疲劳综合征制品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的n-3PUFA磷脂包括EPA磷脂和DHA磷脂。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述EPA磷脂为EPA磷脂酰胆碱、EPA磷脂酰乙醇胺、EPA磷脂酰丝氨酸、EPA磷脂酰肌醇的一种或多种混合。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述DHA磷脂为DHA磷脂酰胆碱、DHA磷脂酰乙醇胺、DHA磷脂酰丝氨酸和DHA磷脂酰肌醇中的一种或多种混合。

5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述EPA磷脂的制备方法包括以下步骤：

1）海参经真空冷冻干燥粉碎后，制成粉末；

2）取海参干粉，在氯仿和甲醇的混合溶液中抽提过夜，过滤后，用氯化钾溶液抽提，静置分层，收集氯仿层，经减压浓缩得到海参脂质粗提取物；

3）将硅胶经活化装柱后，用氯仿平衡硅胶柱 ；再将步骤 2）得到的海参脂质粗提物用氯仿溶解后，缓慢倒入硅胶柱中，依次用氯仿、氯仿-甲醇混合液、丙酮和甲醇进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液进行薄层硅胶板层析，并用碘和Dittmer试剂显色确认后减压浓缩去除残留有机溶剂即得到海参磷脂；

其中，收集氯仿-甲醇的洗脱液为EPA磷脂酰乙醇胺，收集甲醇的洗脱液为EPA磷脂酰胆碱；

4）将醋酸/醋酸钠溶液缓冲液放入集热式恒温加热磁力搅拌器中预热，将 L-丝氨酸溶于其中，加入上述步骤3）中的EPA磷脂酰胆碱，最后加入PLD，在 40 ℃下搅拌反应，加入 HCl、灭活酶，反应终止，用正己烷-异丙醇提取反应产物，即得到EPA磷脂酰丝氨酸；

5）将步骤 2）中海参脂质粗提取物，加入丙酮、三甲胺和乙酸酐，冷却过滤后，用丙酮洗脱，得到EPA磷脂酰肌醇。

6.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述DHA磷脂的制备方法包括以下步骤：

1）鱿鱼卵经真空冷冻干燥粉碎后，制成粉末；

2）取鱿鱼卵干粉，在氯仿和甲醇混合溶液中抽提过夜，过滤后，用氯化钾溶液抽提，静置分层，收集氯仿层，经减压浓缩得到鱿鱼卵脂质粗提取物；

3）将硅胶经活化装柱后，用氯仿平衡硅胶柱 ；再将步骤 2）得到的鱿鱼卵的脂质粗提物用氯仿溶解后，缓慢倒入硅胶柱中，依次用氯仿、氯仿-甲醇混合液、丙酮和甲醇进行洗脱，收集洗脱液，洗脱液进行薄层硅胶板层析，并用碘和Dittmer试剂显色确认后减压浓缩去除残留有机溶剂即得到鱿鱼卵磷脂；

其中，收集氯仿-甲醇的洗脱液为DHA磷脂酰乙醇胺，收集甲醇的洗脱液为DHA磷脂酰胆碱；

4）将醋酸/醋酸钠溶液缓冲液放入集热式恒温加热磁力搅拌器中预热，将 L-丝氨酸溶于其中，加入上述步骤3）中的DHA磷脂酰胆碱，最后加入PLD，在 40 ℃下搅拌反应，加入 HCl，灭活酶，反应终止，用正己烷-异丙醇提取反应产物，即得到DHA磷脂酰丝氨酸；

5）将步骤 2）中鱿鱼卵脂质粗提取物，加入丙酮、三甲胺和乙酸酐，冷却过滤后，用丙酮洗脱，得到DHA磷脂酰肌醇。

7.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的改善慢性疲劳综合征制品为食品、饲料或药品；其中，所述EPA或DHA磷脂的总添加质量分数在0.5%-2%。