[发明专利]产腈水解酶的酵母菌株选育及其在腈类化合物生物转化中的应用有效
| 申请号: | 201710127903.X | 申请日: | 2017-03-06 |
| 公开(公告)号: | CN107022497B | 公开(公告)日: | 2019-09-20 |
| 发明(设计)人: | 许正宏;史劲松;张强;龚劲松;李恒;窦文芳 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
| 主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/02;C12P7/42;C12R1/645 |
| 代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
| 地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 水解 酵母 菌株 选育 及其 化合物 生物转化 中的 应用 | ||
1.一株产腈水解酶的酵母菌株,该菌株属于季也蒙毕赤酵母(Meyerozymaguilliermondii)3H2-2,现保藏在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.12935,保藏日期为2016年9月5日。
2.权利要求1所述的季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2的培养方法,其特征在于,该菌株发酵产酶培养基中含有3-羟基丙腈0.5-4g/L,其他组分包含但不限于以下组分,按质量体积比为:酵母粉5-15g/L,蛋白胨5-20g/L,NaCl 0.5-4g/L,KH2PO4 1-5g/L,K2HPO4 1-5g/L,甘油5-15g/L,其培养基pH 5.0-8.0,培养条件为在转速为100-250r/min的摇床中于25-40℃培养20-60h。
3.季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2转化3-羟基丙腈生成3-羟基丙酸的方法,其特征在于:
(1)季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2菌体收集:根据权利要求2所述的产酶培养方法进行季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2的发酵培养,发酵结束后,在8000-15000rpm条件下离心2~10min,收集经培养获得的菌体,用0.01-0.5M,pH6.0-8.0的磷酸盐缓冲液洗涤菌体2~4次;
(2)生物转化:将季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)3H2-2菌体重悬于缓冲液中,并与3-羟基丙腈溶液混匀,添加0.5%-10%终浓度的葡萄糖,反应温度保持在20-60℃,搅拌转速保持在50-250r/min,反应时间10~150h。
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