[发明专利]去氢吴茱萸碱的制备方法及其抗农业病原菌的用途

说明书

技术领域

本发明提供了具有农药开发价值的去氢吴茱萸碱的制备方法及其在抗农业病原菌中的用途。其分离方法和结晶方法快捷、简单、实用，与以往的技术比较，方法新颖，具有明显的创新性。

背景技术

芸香科（Rutaceae）吴茱萸属（Evodia）全世界约有150种，分布于亚洲、非洲东部和大洋洲。我国有20种5变种，其中多数为民间常用中草药，主产于贵州、云南、广西、广东、湖北、湖南、江西、四川、安徽、浙江等地，早在《神农本草经》中就有吴茱萸的记载，应用历史悠久，临床效果显著，具有散寒止痛、降逆止呕、助阳止泻、疏肝解郁、行气止痛之功效，颇受人们的关注。

吴茱萸属的主要化学成分：生物碱类、苦味素类、黄酮类、苯并吡喃酮类、降倍半萜类、挥发油等，果实中主要活性成分为吴茱萸碱、吴茱萸次碱和去氢吴茱萸碱。该类化合物主要药理活性有扩张血管、降压、强心、止泻、收缩子宫、杀虫、抗菌、抗病毒、抗溃疡、抗胆碱酯酶、抗遗忘症和抗肿瘤作用。

发明内容

本发明提供了去氢吴茱萸碱的提取、分离、纯化的方法是，取吴茱萸属（Evodia）植物吴茱萸（E. rutaecarpa (Juss.) Benth）、石虎（E. rutaecarpa var. officinalis(Dode) Huang）、疏毛吴茱萸（E. rutaecarpa var. bodinieri (Dode) Huang）、华南吴萸（E. austrosinensis）、臭辣吴萸（E. fargesii）及臭檀吴萸（E. daniellii）的鲜（或干）果实，或者其粉碎品，用水、甲醇、乙醇、丙酮等溶剂或其二种、多种混合溶剂提取，提取液70℃以下真空浓缩至干（或无有机溶剂），加水至合适的体积，去除沉淀（如有沉淀），上常规处理好的吸附柱，用水洗去杂质，至近无色，再用5-50%的乙醇（或甲醇）洗脱，并收集此部分洗脱液，70℃以下真空浓缩至干（或无有机溶剂），加水至合适的体积，用适量活性炭脱色，脱色后的溶液70℃以下真空浓缩至干，即得去氢吴茱萸碱粗品，去氢吴茱萸碱粗品加适量20%的乙醇（或20%甲醇、20%丙酮），洗去色素，固体用无水溶剂如甲醇、乙醇、丙酮或者是混合液，或者是它们与氯仿（或乙酸乙酯）的混合液溶解，后加入适量氯仿（或乙酸乙酯），放置使其结晶和重结晶。

1、上述从原药材提取含有去氢吴茱萸碱的浸膏所用的溶剂可以是水、乙醇、甲醇、丙酮，即可以单独使用，也可以二种或二种以上的溶剂合并使用。

2、上述从原药材提取含有去氢吴茱萸碱的浸膏可以用回流提取，也可以用渗漉提取或者用索氏提取器提取。

3、上述填充吸附柱所用的填料可以是非极性或弱极性的树脂，例如：苯乙烯型（包括甲基苯乙烯型、乙基苯乙烯型）或者丙烯腈型共聚体树脂，也可以是阳离子交换树脂，硅胶，凝胶，ODS等填料。

本发明提供了所述去氢吴茱萸碱对农业病原真菌、细菌的抑制活性，所述化合物对农业病原细菌具有强烈的抑制活性。

去氢吴茱萸碱的结构鉴定

去氢吴茱萸碱的化学结构式1或2

黄色颗粒状结晶，m.p.215-217℃（氯仿-甲醇），热溶于氯仿、甲醇的混合溶剂，不溶于丙酮。改良碘化铋钾试剂显棕红色，提示该化合物可能是生物碱。红外光谱显示有NH（3413 cm^-1）、羰基（1706 cm^-1）、苯环（1610，1498 cm^-1），双键（1544 cm^-1）。ESI-MS显示该化合物的准分子离子峰为302 [M+H-Cl]⁺（100），表明其分子量为301。结合氢谱、碳谱可确定该化合物的分子式为[C₁₉H₁₆N₃O]⁺，不饱和度为14。