[发明专利]一种鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法有效
申请号: | 201710099269.3 | 申请日: | 2017-02-23 |
公开(公告)号: | CN106967783B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 苗红梅;常淑娴;张海洋;段迎辉;曲文文;琚铭;赵瑞红 | 申请(专利权)人: | 河南省农业科学院芝麻研究中心 |
主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 | 代理人: | 时立新 |
地址: | 450000 *** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 评价 芝麻 枯萎病 抗性 水平 方法 | ||
1.一种鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法,其特征在于,该方法具体包括如下步骤:
(1)准备芝麻植株
挑选待测芝麻品种健康成熟种子,灭菌处理后,培养至种子露白;
将露白后芝麻种子播种于盛有无菌蛭石的容器中;
用营养液进行浇灌;培养1~2个月后用于接菌处理;
(2)制备浸染用分生孢子悬浮液
根据试验目的,挑选尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株,培养制备分生孢子悬浮液,悬浮液中孢子数为:1×106cfu/mL ~ 1×107cfu/mL;
(3)浸根接菌
选择步骤(1)中生长健壮一致的芝麻植株,洗去根部粘带的蛭石;
将芝麻植株根系全部浸入步骤(2)所制备分生孢子悬浮液中10~30min;
将接菌后植株重新栽入蛭石中,培养,并定期浇灌营养液,保证植株生长需要的营养;
以清水浸泡同等时间的芝麻幼苗作为不接菌阴性对照,相同培养条件培养;
(4)芝麻品种枯萎病抗性鉴定评价,
对步骤(3)中接菌后芝麻植株的枯萎病发病情况进行定期调查,记录发病株数及发病等级,计算枯萎病病情指数,并据此判定芝麻品种枯萎病抗性能力,或者对特定菌株的对芝麻的枯萎病致病能力进行判定。
2.如权利要求1所述鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法,其特征在于,步骤(1)、步骤(3)中所述营养液均为改良Hoagland营养液;其配方为:四水硝酸钙945mg/L、硝酸钾506mg/L、硝酸铵80mg/L、磷酸二氢钾136mg/L、硫酸镁493mg/L、铁盐溶液2.5mL和微量元素液5mL,pH=6.0;
所述铁盐溶液配方为:七水硫酸亚铁2.78g和乙二胺四乙酸二钠3.73g,蒸馏水500mL,pH=5.5;
所述微量元素液配方为:碘化钾0.83mg/L、硼酸6.2mg/L、硫酸锰22.3mg/L、硫酸锌8.6mg/L、钼酸钠0.25mg/L、硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L。
3.如权利要求1所述鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法,其特征在于,步骤(1)、步骤(3)中芝麻种子或芝麻植株的培养条件为:温度25~28℃、相对湿度为60~80%、每天15h/9h光暗交替。
4.如权利要求1所述鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法,其特征在于,步骤(2)中所述悬浮液采用PDB液体培养基制备而成,
所述PDB液体培养基,每1000mL蒸馏水中含:马铃薯200g,葡萄糖20g。
5.如权利要求1所述鉴定评价芝麻枯萎病抗性水平的方法,其特征在于,所述尖孢镰刀菌芝麻专化型菌株的培养条件为:28℃、160~180rpm振荡培养。
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