[发明专利]一种荧光定量PCR检测鉴定比萨茶蜗牛的方法有效
| 申请号： | 201710089556.6 | 申请日： | 2017-02-20 |
| 公开（公告）号： | CN106755524B | 公开（公告）日： | 2019-08-23 |
| 发明（设计）人： | 周卫川;王沛;王宇;林俊宏;林阳武 | 申请（专利权）人： | 福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊;陈彩芳 |
| 地址： | 350003 福建省*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 定量 pcr 检测 鉴定 比萨 蜗牛 方法 | ||
1.一种荧光定量PCR检测鉴定比萨茶蜗牛的方法，其特征在于：所述方法是应用特异性引物及探针对比萨茶蜗牛的分子特征进行识别，所述引物及探针为：
上游引物为TPF：5’- GCTGGAAAGTGGAGGCCGTA -3’，
下游引物为TPR：5’- GCGGCGTCGGTTAAGAGAGA-3’，
荧光探针为TPP：5’-FAM-AGCTGTTCCGGGCACCAAGACGTCACG-BHQ-3’，5’端标记的荧光报告基团是FAM，3’端标记的荧光淬灭基团是BHQ，
以上引物及探针浓度均为10μmol/L。
2.根据权利要求1所述的一种荧光定量PCR检测鉴定比萨茶蜗牛的方法，其特征在于：利用权利要求1所述的引物及探针进行荧光定量PCR反应，反应体系总体积为25μL，其中2×TaqMan PCR Master Mix 12.5μL，上、下游引物及探针各1μL，DNA模板2μL，余下用灭菌ddH2O补足。
3.根据权利要求2所述的一种荧光定量PCR检测鉴定比萨茶蜗牛的方法，其特征在于：所述荧光定量PCR反应的程序为：95℃预变性5min；95℃ 10s，60℃ 34s，40个循环；结束反应；结果判定：反应结束后根据扩增曲线判定结果，若待测样品产生典型的扩增曲线，且Ct值小于35，则判定待测样品为比萨茶蜗牛，反之，则不是。
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