[发明专利]BCR多样性检测试剂盒及应用在审
申请号: | 201710085553.5 | 申请日: | 2015-08-14 |
公开(公告)号: | CN106834472A | 公开(公告)日: | 2017-06-13 |
发明(设计)人: | 葛良进;刘松;林群婷;刘丽春;曾立董;黄莎莎;黄亮;李改玲 | 申请(专利权)人: | 深圳市瀚海基因生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10;C40B50/06 |
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地址: | 518000 广东省深圳市南山区西丽街道*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | bcr 多样性 检测 试剂盒 应用 | ||
1.一种检测BCR多样性的试剂盒,所述试剂盒包括一组多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物,
所述上游引物由与SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列一一对应的一组序列组成,所述上游引物中的序列比SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:13中的相应序列多或少0~3个核苷酸,
所述下游引物由与SEQ ID NO:14~SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列一一对应的一组序列组成,所述下游引物中的序列比SEQ ID NO:14~SEQ ID NO:17中的相应序列多或少0~3个核苷酸。
2.权利要求1的试剂盒,其特征在于,所述上游引物为SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列组成的上游引物组,所述下游引物为SEQ ID NO:14~SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列组成的下游引物组。
3.权利要求1或2的试剂盒,其特征在于,所述上游引物还包括SEQ ID NO:20~SEQ ID NO:32所示的核苷酸序列,和/或,
所述下游引物还包括SEQ ID NO:33~SEQ ID NO:36所示的核苷酸序列。
4.一种获得BCR基因序列的方法,其特征在于,包括如下步骤:
获取待测样本的核酸;
采用多重PCR反应对所述核酸进行扩增,以获得多重PCR扩增产物,所述多重PCR反应利用权利要求1-3任一项所述的试剂盒进行。
5.权利要求4的方法,其特征在于,所述待测样品核酸为DNA和/或RNA;
任选地,所述核酸的量不少于0.5个人的细胞中所含有的DNA和/或RNA;
任选地,所述待测样本为人外周血单个核细胞;
任选地,所述待测样本来自人白血病微小残留病灶。
6.权利要求4或5的方法,其特征在于,当待测样品核酸为RNA时,所述采用多重PCR反应对所述核酸进行扩增,以获得多重PCR扩增产物的步骤,包括:
以所述上游引物或所述下游引物为反转录引物进行反转录,获得cDNA产物;
以所述cDNA产物为模板,加入相应的下游引物或上游引物以进行所述多重PCR反应,获得所述多重PCR扩增产物。
7.一种制备BCR测序文库的方法,其特征在于,包括如下步骤:
利用权利要求4-6任一方法获得多重PCR扩增产物;
对所述多重PCR扩增产物进行测序文库构建,以获得BCR测序文库。
8.一种测定BCR基因序列的方法,其特征在于,包括:
利用权利要求7的方法获得BCR测序文库;
对所述BCR测序文库进行测序。
9.一种分析BCR多样性的方法,其特征在于,包括:
利用权利要求8的方法,获得测序结果;
对所述测序结果进行分析,以获得BCR多样性的分析结果。
10.权利要求1-3任一试剂盒在获得BCR基因序列和/或检测BCR多样性中的用途。
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