[发明专利]用于诊断PAH基因突变的杂交膜条、PCR引物及试剂盒

权利要求书

1.一种用于诊断PAH基因突变的杂交膜条，其特征在于：包括基底，以及固定在所述基底上的突变检测探针，每一条所述突变检测探针分别对应包含一个PAH基因突变位点，所述PAH基因突变位点包括以下位点：R111X、R176X、EX6-96A>G、R241C、R243Q、R252Q、Y356X、V399V和R413P；每一条所述突变检测探针包含15-25个碱基的序列，在所述序列的中部位置包含其相对应的PAH基因突变位点的突变碱基；所述突变检测探针为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.9所示的序列或其反向互补序列的DNA。

2.根据权利要求1所述的杂交膜条，其特征在于：还包括分别与每一条所述突变检测探针对应的正常对照探针，所述正常对照探针固定在所述基底上的与所述突变检测探针不同的位置上。

3.根据权利要求2所述的杂交膜条，其特征在于：所述正常对照探针为SEQ ID NO.10～SEQ ID NO.18所示的序列或其反向互补序列的DNA。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的杂交膜条，其特征在于：所述突变检测探针的3’或5’端带有氨基标记。

5.根据权利要求2-3任意一项所述的杂交膜条，其特征在于：所述正常对照探针的3’或5’端带有氨基标记。

6.一种用于扩增待检样品基因片段的PCR引物，其特征在于：所述PCR引物的扩增产物含权利要求1所述的PAH基因突变位点，所述PCR引物为以下5对：SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20；SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22；SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24；SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26；SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28；其中SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.27是上游引物；SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28是下游引物。

7.根据权利要求6所述的PCR引物，其特征在于：所述扩增产物分别包括如下位点：引物SEQ ID NO.19和SEQ ID NO.20的扩增产物包含R111X位点，引物SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22的扩增产物分别包含R176X、EX6-96A>G位点，引物SEQ ID NO.23和SEQ ID NO.24的扩增产物包含R241C、R243Q、R252Q位点，引物SEQ ID NO.25和SEQ ID NO.26的扩增产物包含Y356X、V399V位点，引物SEQ ID NO.27和SEQ ID NO.28的扩增产物包含R413P位点。

8.根据权利要求6或7所述的PCR引物，其特征在于：所述上游引物和/或下游引物的5’端带有生物素或荧光标记。

9.一种用于诊断PAH基因突变的试剂盒，其特征在于：包含权利要求1所述的用于诊断PAH基因突变的杂交膜条，以及含有权利要求6所述的用于扩增待检样品基因片段的PCR引物的PCR反应液。