[发明专利]用于诊断前列腺癌的尿样组合标志物及检测试剂盒

说明书

本发明涉及尿样中小分子代谢物乙酰亮氨酸、丙酰基肉碱、丁酰基肉碱、犬尿酸、黄嘌呤核苷、5‑羟基‑L‑色氨酸、硫酸对甲酚和色氨酸作为组合标志物在制备用于诊断受试者中的前列腺癌患者的试剂盒中的新应用。本发明还涉及检测受试者中的前列腺癌患者的试剂盒，通过检测来自男性受试者的尿样中上述组合标志物各自的相对浓度，基于二元逻辑回归方程计算所述组合标志物变量以及确定的截点值，判断所述受试者是否是前列腺癌患者。上述几种小分子代谢物联合使用，可在辅助诊断前列腺癌特别是处于临床“诊断灰区”的前列腺癌中得到应用。

技术领域

本发明涉及一种新的小分子组合标志物在前列腺癌诊断中的应用。属于分析化学及临床医学及医学领域。

背景技术

前列腺癌(Prostate cancer，PCa)是严重威胁男性健康的恶性肿瘤之一。前列腺癌多发于欧美发达国家，其发病率居男性恶性肿瘤的首位，死亡率居第二位，仅次于肺癌。2016年，美国预计前列腺癌新增病例数为180890例，死亡数为26120例。我国前列腺癌的发病率较欧美发达国家为低，但近年来也有逐渐上升的趋势，且发病年龄趋于年轻化。由于前列腺癌的病理发展过程千变万化，不同个体的差别很大，早期前列腺癌的症状极不典型，临床分期也比较复杂，因此，前列腺癌在诊断上遇到瓶颈，以至于确诊时已多属于晚期。目前，临床上主要采用血清中前列腺特异性抗原(Prostate specific antigen， PSA)作为前列腺癌诊断的肿瘤标志物，但其特异性和灵敏度有限，当PSA浓度在4.0～ 10.0ng/mL即所谓“诊断灰区”时给前列腺癌与前列腺良性增生的鉴别诊断带来困难，增加了很多不必要的穿刺活检。因此开发新的灵敏度更高，特异性更强的生物标志物及其检测方法以用于临床十分迫切。

已有研究表明，前列腺癌的发生涉及多条代谢通路的改变，表现在尿样样本中氨基酸、有机酸、酰基肉碱、磷脂酰胆碱、核苷以及糖类等小分子代谢物的含量在前列腺癌患者与正常人和前列腺良性增生人群之间存在显著差异[参考文献1：Ana Rita Lima, Mariade Lourdes Bastos,Márcia Carvalho,and Paula Guedes de Pinho.Translationaloncology,2016；9(4):357-370]。通过采用色谱质谱联用技术检测体液中的小分子代谢物，在疾病诊断中已经显示出优势并有成功的应用案例。如采用液相色谱质谱联用技术检测尿样中肌氨酸的含量来判别前列腺癌的进展[参考文献2：Arun Sreekumar,Laila M.Poisson,Thekkelnaycke M.Rajendiran,Amjad P.Khan,Qi Cao,Jindan Yu,BharathiLaxman, Rohit Mehra,Robert J.Lonigro,Yong Li,Mukesh K.Nyati,Aarif Ahsan,Shanker Kalyana-Sundaram,Bo Han,Xuhong Cao,Jaeman Byun,Gilbert S.Omenn,Debashis Ghosh, Subramaniam Pennathur,Danny C.Alexander,Alvin Berger,JeffreyR.Shuster,John T.Wei, Sooryanarayana Varambally,Christopher BeecherArulM.Chinnaiyan.Nature,2009； 457(7231):910-914],甘氨鹅脱氧胆酸用于肝癌的诊断和预后评价[参考文献3：Baohong Wang,Deying Chen,Yu Chen,Zhenhua Hu,Min Cao,QingXie,Yanfei Chen,Jiali Xu, Shusen Zheng,and Lanjuan Li.Journal of proteome,2012；11(2):1217-1227]，组合标志物脯氨酰基羟脯氨酸、L-同型半胱氨酸、2-辛烯酰基肉碱、N-苯乙酰基-L-谷氨酰胺用于肝郁脾虚综合征的诊断[参考文献4：Aihua Zhang,HuiSun,Ying Han,Ye Yuan,Ping Wang, Gaochen Song,Xiaoxia Yuan,Miao Zhang,Ning Xieand Xijun Wang.Analyst,2012；137: 4200-4208]等。鉴于此，本发明采用色谱质谱联用技术分析检测尿样中的代谢物，并通过化学计量学分析筛选出组合标志物，有望为前列腺癌的临床诊断提供新的有效检测手段。