[发明专利]一种L‑茶氨酸锌螯合物及制备方法和含该螯合物的茶饮料及制备方法

权利要求书

1.一种L-茶氨酸锌螯合物的制备方法，其特征在于，以L-茶氨酸和锌盐为原料，以pH值为2-7的缓冲液为反应介质构成反应体系，在30-70℃下混合，反应完全后将反应液分离纯化，获得L-茶氨酸锌螯合物；

所述L-茶氨酸与锌盐溶液质量比为(5-1)：1；所述的L-茶氨酸由枯草芽孢杆菌发酵所产的γ-谷氨酰转肽酶，以L-谷氨酰胺和乙胺盐酸盐为底物发酵制备得到。

2.根据权利要求1所述的一种L-茶氨酸锌螯合物的制备方法，其特征在于，所述L-茶氨酸锌螯合物具体制备步骤如下：

步骤1，合成L-茶氨酸原料液；

步骤2，将L-茶氨酸原料液脱色过滤后，滤液备用；

步骤3，在滤液中加入质量浓度为20％的锌盐溶液；用柠檬酸调节至pH值为2-7，氮气吹扫，于30-70℃下搅拌10-30min进行螯合反应；

步骤4，螯合反应结束后，自然冷却至室温，进行纯化；将反应液离心后，除去上清液，将沉淀用95％的乙醇洗涤抽滤多次，取滤饼干燥后得到L-茶氨酸锌螯合物。

3.根据权利要求2所述的一种L-茶氨酸锌螯合物的制备方法，其特征在于，所述的步骤1的具体步骤如下，

1.1将枯草芽孢杆菌接种在平板培养基上，在37℃下静置培养16h进行一次活化后，再转接到液体培养基上进行二次活化；将经两次活化好的枯草芽孢杆菌二级种子液按体积比3％接种量转接于30mL发酵培养液中，置于恒温培养箱中37℃振荡培养12-16h；

1.2收集振荡培养的发酵液离心后得γ-谷氨酰转肽酶粗酶液；采用分光光度计测定酶活，选取酶活0.01U/mL-0.2U/mL的粗酶液备用，进行催化反应；

1.3分别加入粗酶液质量10％的L-谷氨酰胺和粗酶液质量10％的乙胺盐酸盐溶液进行催化反应，L-谷氨酰胺的浓度为15-50mmol/L，乙胺盐酸盐的浓度为20-80mmol/L；用乙胺水调节催化反应体系至pH值为10，37℃静置培养5-8h，合成L-茶氨酸，得到L-茶氨酸原料液。

4.根据权利要求3所述的一种L-茶氨酸锌螯合物的制备方法，其特征在于，步骤2中，加入L-茶氨酸原料液重量2％的活性炭进行吸附脱色，反应过程温度为60-80℃，反应时间为3-8min。

5.根据权利要求1所述的一种L-茶氨酸锌螯合物的制备方法，其特征在于，所述锌盐为硫酸锌或氯化锌。

6.一种由权利要求1-5任意一项所述的方法制备得到的L-茶氨酸锌螯合物。

7.一种含L-茶氨酸锌螯合物的茶饮料制备方法，其特征在于，包括如下步骤，

步骤1，将权利要求6所述的L-茶氨酸锌螯合物和纯净水配制成质量体积分数为10-30％的溶液，然后添加质量体积分数为3-8％的营养物、将调味剂和悬浮剂混合均匀加入到溶液中，最后加入质量体积分数为2-5％的柠檬酸和质量体积分数为2％的护色剂得到混合溶液；

步骤2，将混合溶液依次经过湿热灭菌后置于冷水浴中冷却，即获得含L-茶氨酸锌螯合物的茶饮料。

8.根据权利要求7所述的一种含L-茶氨酸锌螯合物的茶饮料制备方法，其特征在于，湿热灭菌的灭菌温度为121℃，灭菌时间为15min。

9.根据权利要求7所述的一种含L-茶氨酸锌螯合物的茶饮料制备方法，其特征在于，所述的营养物采用维生素C；所述的调味剂包括质量体积分数为3-5％的蔗糖和质量体积分数为1-3％的甜赛糖。

10.一种由权利要求7-9任意一项所述的方法制备得到的含L-茶氨酸锌螯合物的茶饮料。