[发明专利]一种用于表达米曲霉葡萄糖淀粉酶的启动子及其应用在审
| 申请号： | 201710036772.4 | 申请日： | 2017-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN106591312A | 公开（公告）日： | 2017-04-26 |
| 发明（设计）人： | 刘龙;陈坚;刘晶晶;堵国成;李江华;房峻 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/80;C12N1/15;C12P7/46;C12R1/69 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 表达 曲霉 葡萄糖 淀粉酶 启动子 及其 应用 | ||
1.一种淀粉诱导型强启动子，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.构建权利要求1所述启动子的方法，其特征在于，是将GenBank登录号为AP007175.1的核苷酸序列位于1942232～1942328处的97个bp碱基串联五个拷贝。
3.携带权利要求1所述的淀粉诱导型强启动子的载体或细胞系。
4.一种基因工程菌，其特征在于，在启动子PN5/或PglaA的介导下，表达编码葡萄糖淀粉酶的基因glaA；所述启动子PN5的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
5.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述编码葡萄糖淀粉酶的基因glaA是NCBI Gene ID为5999830的基因。
6.根据权利要求4或5所述的基因工程菌，其特征在于，所述启动子PglaA序列如SEQ ID NO.2所示。
7.根据权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，以米曲霉为宿主，以质粒pMD19为载体。
8.构建权利要求7所述基因工程菌的方法，其特征在于，以质粒pMD19为载体，分别与SEQ ID NO.1所示启动子和NCBI Gene ID为5999830的基因glaA连接，转化至米曲霉细胞中。
9.一种生产L-苹果酸的方法，其特征在于，将权利要求4-5，7-8任一所述的基因工程菌接种至发酵培养基中，28～30℃，200～250rpm发酵48～120h。
10.权利要求4-5,7-8任一所述的基因工程菌在食品、生物领域制备有机酸方面的应用。
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