[发明专利]一种用于同时鉴定中药人参、西洋参和三七的引物组合及其应用有效
申请号: | 201710014165.8 | 申请日: | 2017-01-09 |
公开(公告)号: | CN106701955B | 公开(公告)日: | 2020-03-03 |
发明(设计)人: | 袁媛;蒋超;黄璐琦;赵玉洋 | 申请(专利权)人: | 中国中医科学院中药研究所 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
地址: | 100700 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 同时 鉴定 中药 人参 西洋参 三七 引物 组合 及其 应用 | ||
1.引物组合,由引物对Ⅰ、引物对Ⅱ和引物对Ⅲ组成;
所述引物对Ⅰ由引物F1和引物F2组成;
所述引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子;
所述引物F2为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物对Ⅱ由引物F3和引物F4组成;
所述引物F3为序列表的序列3所示的单链DNA分子;
所述引物F4为序列表的序列4所示的单链DNA分子;
所述引物对Ⅲ由引物F5和引物F6组成;
所述引物F5为序列表的序列5所示的单链DNA分子;
所述引物F6为序列表的序列6所示的单链DNA分子。
2.权利要求1所述引物组合的应用,为如下(b1)至(b6)中的任意一种:
(b1)鉴别人参、三七和西洋参;
(b2)制备用于鉴别人参、三七和西洋参的试剂盒;
(b3)鉴定待测药材是否为人参、三七或西洋参;
(b4)制备用于鉴定待测药材是否为人参、三七或西洋参的试剂盒;
(b5)鉴定待测样品中是否含有人参和/或三七和/或西洋参;
(b6)制备用于鉴定待测样品中是否含有人参和/或三七和/或西洋参的试剂盒。
3.含有权利要求1所述引物组合的试剂盒;所述试剂盒的用途为如下(c1)或(c2)或(c3):
(c1)鉴别人参、三七和西洋参;
(c2)鉴定待测药材是否为人参、三七或西洋参;
(c3)鉴定待测样品中是否含有人参和/或三七和/或西洋参。
4.权利要求3所述试剂盒的制备方法,包括将各条引物单独包装的步骤。
5.鉴别由单一原料加工的待测药材的原料为人参、三七还是西洋参的方法,为如下方法Ⅰ或方法Ⅱ;
所述方法Ⅰ包括如下步骤:提取待测药材基因组DNA;以所述基因组DNA为模板,采用权利要求1所述的引物组合进行PCR扩增,如果扩增产物中含有247bp的DNA片段、待测药材的原料为人参,如果扩增产物中含有492bp的DNA片段、待测药材的原料为三七,如果扩增产物中含有1088bp的DNA片段、待测药材的原料为西洋参;
所述方法Ⅱ包括如下步骤:检测待测药材基因组DNA中是否含有权利要求1所述的引物组合中的引物对Ⅰ的靶序列、引物对Ⅱ的靶序列或引物对Ⅲ的靶序列;如果所述基因组DNA中含有引物对Ⅰ的靶序列、待测药材的原料为人参,如果所述基因组DNA中含有引物对Ⅱ的靶序列、待测药材的原料为三七,如果所述基因组DNA中含有引物对Ⅲ的靶序列、待测药材的原料为西洋参;
所述引物对Ⅰ的靶序列为序列表的序列7所示的DNA分子;
所述引物对Ⅱ的靶序列为序列表的序列8所示的DNA分子;
所述引物对Ⅲ的靶序列为序列表的序列9所示的DNA分子。
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