[发明专利]用于内化酶的组合物和方法

说明书

本发明公开了用于治疗溶酶体贮积病的组合物和方法。本发明公开了含有内化效应物结合结构域和溶酶体替代酶活性的生物治疗复合物。生物治疗复合物能够进入细胞，隔离到溶酶体内，并且将替代酶活性递送到溶酶体。

技术领域

本专利申请大体上涉及用于治疗溶酶体贮积病的组合物和方法。本专利申请特别涉及含有替代酶的靶向蛋白质复合物及其在治疗溶酶体贮积病中的用途。

背景技术

溶酶体贮积病是影响溶酶体中无数底物降解的一类罕见疾病。那些底物包括鞘脂、粘多糖、糖蛋白、糖原和寡糖，它们可在患有疾病的那些人的细胞中累积，导致细胞死亡。受溶酶体贮积病影响的器官包括中枢神经系统(CNS)、外周神经系统(PNS)、肺、肝、骨、骨骼肌和心肌、以及网状内皮系统。

治疗溶酶体贮积病的选项包括酶替代疗法(ERT)、底物减少疗法、药物分子伴侣介导疗法、造血干细胞移植疗法和基因疗法。底物减少疗法的例子包括使用美格鲁特或依利格鲁司特治疗1型戈谢病。这些药物通过阻断合酶活性起作用，所述合酶减少了后续底物产生。例如，造血干细胞疗法(HSCT)用于改善和减缓患有某些形式的MPS的患者中的负中枢神经系统表型。参见R.M.Boustany,Lysosomal storage diseases--the horizonexpands,9(10)Nat.Rev.Neurol.583-98，2013年10月。表1列出了一些溶酶体贮积病及其相关酶或其它蛋白质。

表1：溶酶体贮积病

两种最常见的LSD是庞贝氏症和法布里病。庞贝氏症由有缺陷的溶酶体酶α-葡糖苷酶(GAA)引起，这导致溶酶体糖原的加工缺陷。溶酶体糖原的累积主要发生在骨骼、心脏和肝脏组织中。婴儿发作型庞贝氏症通常在2岁前导致心脏扩张、张力减退、肝肿大和由于心肺衰竭的死亡。成人发作型庞贝氏症晚至二十至六十年发生，并且通常只涉及骨骼肌。

法布里病由缺陷型溶酶体酶α-半乳糖苷酶A(GLA)引起，其导致球形三脂酰基鞘氨醇在血管及其它组织和器官内的累积。与法布里病相关的症状包括来自神经损伤和/或小血管阻塞的疼痛，肾功能不全和最终的衰竭，心脏并发症如高血压和心肌病，皮肤病症状如血管角化瘤的形成、无汗症或多汗症，以及眼部问题如角膜涡状营养不良、轮辐状白内障、以及结膜和视网膜血管异常。

用于溶酶体贮积病的目前治疗不太理想。例如，ERT一般必须以高频率和高剂量施用，例如每两周一次和高达40mg/kg。另外，一些替代的酶可为免疫学交叉反应性的(CRIM)，刺激受试者中IgG的产生并且因此阻碍酶经由甘露糖-6-磷酸(M6P)受体递送至溶酶体。IgG可屏蔽替代酶的M6P残基，并且抗原-IgG-抗体复合物可经由Fc受体摄取到细胞溶酶体内，从而优先将替代酶分流至巨噬细胞。

将替代酶递送至适当的受累组织也是无效的(参见表2和DesnickSchuchman,“Enzyme replacement therapy for lysosomal diseases:lessons from 20years ofexperience and remaining challenges,”13Annu.Rev.Genomics Hum.Genet.307-35,2012)。例如，经历用于婴儿型庞贝氏症的长期酶替代治疗的患者仍然可能患有言语鼻音过重、残余肌肉无力、上睑下垂、骨量减少、听力丧失、误吸风险、咽下困难、心律失常和吞咽困难。替代酶的剂量通常必须随着时间过去增加至每周一次或每两周一次40mg/kg。

表2：ERT的无效组织靶向