[发明专利]一种热稳定性提高的碱性果胶酶突变体有效
| 申请号： | 201611222643.6 | 申请日： | 2016-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN106754848B | 公开（公告）日： | 2020-11-03 |
| 发明（设计）人： | 刘松;陈坚;堵国成;赵伟欣;黎青华 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C07K19/00;C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 彭素琴 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 热稳定性 提高 碱性 果胶酶 突变体 | ||
【权利要求书】：
1.一种碱性果胶酶突变体，其特征在于，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.编码权利要求1所述碱性果胶酶突变体的基因。
3.含有权利要求1所述碱性果胶酶突变体的细胞系。
4.携带权利要求2所述基因的载体。
5.一种提高碱性果胶酶热稳定性的方法，其特征在于，将SEQ ID NO.3所示碱性果胶酶的N端通过PT-Linker连接SEQ ID NO.4所示的双亲短肽。
6.一种产碱性果胶酶的基因工程菌，其特征在于，以大肠杆菌为宿主、以pET-22b(+)为载体，表达SEQ ID NO.1所示碱性果胶酶突变体。
7.权利要求6所述基因工程菌的构建方法，是以pET-22b(+)为载体，将SEQ ID NO.2所示基因与载体连接，转化至大肠杆菌中。
8.一种碱性果胶酶的生产方法，其特征在于，是将权利要求5所述的基因工程菌接种至发酵培养基，于30～37℃培养至OD600＝0.6～1.0，加入终浓度0.04～0.06mmol/L的IPTG，于28～30℃诱导24～72h。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述接种是按体积接种3～5％的种子液。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，发酵培养基为TB培养基。
11.权利要求6所述的基因工程菌在在纺织、食品、造纸、环境领域制备碱性果胶酶中的应用。
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