[发明专利]猪轮状病毒毒株、疫苗组合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种猪轮状病毒毒株HN03株，该株具有良好的免疫原性，其灭活抗原和亚单位抗原制备的疫苗组合物能对猪产生良好的保护作用，本发明的制备含有猪轮状病毒灭活抗原的疫苗组合物的方法，能培养产生高滴毒的病毒，抗原含量高，从而保证疫苗的免疫效力。

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，具体涉及一种猪轮状病毒毒株及其疫苗组合物、制备方法和应用。

背景技术

轮状病毒(Rotavirus，RV)是呼肠孤病毒科(Reoviridae)，轮状病毒属(Rotavirus)成员，是引起婴幼儿和多种幼龄动物病毒性腹泻的主要病原体。仔猪、犊牛、绵羊、山羊、幼驹、鸡、火鸡及其他禽类均可感染轮状病毒。

猪轮状病毒(Porcine Rotavirus，PRoV)主要引起仔猪的腹泻，并伴有厌食、呕吐、脱水等临床症状。该病主要通过粪便传播，可感染各种年龄、性别的猪，3～5周的仔猪感染率较高，仔猪感染猪轮状病毒后，在粪便中排毒的持续时间约1～14天，且常与猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒等肠道病毒混合感染，并且易继发其他细菌性感染。该病在世界范围内广泛流行，导致仔猪生长缓慢或死亡率升高，给养猪业造成了巨大的经济损失。

目前对于猪轮状病毒病没有有效的药物，常规治疗方法不佳，疫苗是预防和控制该病的主要措施。然而，猪轮状病毒的分离比较困难，且分离的病毒株病毒滴度较低，不利于后期的培养增殖，造成制备的疫苗组合物免疫效力不高，无法有效对猪轮状病毒病进行有效防控。因此，亟需分离出免疫原性良好的国内流行的猪轮状病毒野毒株，将其制备成高效的灭活疫苗对预防和/治疗猪轮状病毒疫情，具有深远的现实意义。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种猪轮状病毒毒株、及其制备的灭活疫苗及其制备方法以及应用，该疫苗能够有效预防猪轮状病毒的感染。

本发明涉及一种从感染的组织和样本中分离猪轮状病毒毒株的方法，本发明的分离方法能从含病毒滴度低的组织和样本中有效分离猪轮状病毒，对同一样本或组织分离病毒时，使用本发明的分离方法分离的毒株滴度普遍更高。

本发明涉及一种猪轮状病毒毒株，该毒株具有强毒性和良好的免疫原性。

本发明还涉及一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的所述猪轮状病毒毒株抗原和/或兽医学上可接受的载体；其中，所述猪轮状病毒抗原包括灭活的全病毒抗原或亚单位抗原。所述疫苗组合物由强毒株制备，具有良好的免疫原性，能对猪提供完全的保护。

本发明还涉及所述疫苗组合物的制备方法，本发明的疫苗组合物的制备方法所培养的病毒滴度高，能提供更高含量的抗原成分。

本发明还涉及所述疫苗组合物在制备预防和/或治疗猪轮状病毒相关疾病中的应用。

本发明的猪轮状病毒毒株为流行的猪轮状病毒野毒株，用该毒株制备成疫苗组合物可预防和/或治疗猪轮状病毒疫情蔓延，并且含该毒株的疫苗组合物免疫动物后能使动物机体快速产生抗体，对当前流行的猪轮状病毒单独或混合感染有良好的预防和控制效果，生物安全性好。

具体实施方式

以下，对本发明的实施方式进行说明。

本发明涉及一种猪轮状病毒的分离方法，所述分离方法包括：步骤(1)获取表现典型猪轮状病毒感染症状的猪的小肠内容物或粪便；步骤(2)使用胰酶处理所述小肠内容物或粪便；步骤(3)将所述胰酶处理所述小肠内容物或粪便稀释，接种于培养好的单层传代细胞，添加细胞维持液，培养病毒。

术语“猪轮状病毒”(Porcine Rotavirus，PRoV)属呼肠孤病毒科、轮状病毒属成员，由11个双股RNA片段组成，所引发的临床症状包括腹泻，并伴有厌食、呕吐、脱水等。病理变化以小肠肠壁透明菲薄、水样内容物、小肠绒毛萎缩为特征。