[发明专利]一种分离制备乳香单体的方法

说明书

本发明公开了一种分离制备乳香单体的方法，步骤如下：（1）乳香粗提物的制备：取乳香药材，粉碎，采用乙醇溶液加热提取数次，合并滤液，减压旋蒸，冷冻干燥，得到乳香粗提物；（2）将步骤（1）获得的乳香粗提物采用水溶解，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液过滤，减压浓缩分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取段；（3）萜类单体的分离：采用高速逆流色谱方法对步骤（2）中的乙酸乙酯萃取段进行萜类化合物的分离纯化。本发明方法克服了传统制备方法操作复杂，样品死吸附损失，收率低等缺点。本方法效率高，操作简单，制备量大，综合成本低，具有很好的推广使用价值。

技术领域

本发明属于中药有效成分的高效制备技术领域，具体涉及一种高速逆流色谱分离纯化乳香中萜类单体的方法。

背景技术

乳香，为橄榄科乳香属植物卡氏乳香树(Boswellia carterii Birdw.)及同属植物鲍达乳香树(Boswellia bhaw-dajiana Birdw.)树皮渗出的树脂，主产于索马里、埃塞俄比亚等地。乳香辛散温通，具有活血、止痛、消肿、生肌之功效，主治气血凝滞、心腹疼痛、痈疫肿毒、跌打损伤、痛经、产后瘀阻等。研究发现乳香具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等药理作用。就制剂而言，国内的乳香类药物主要为复方制剂，乳香的单方制剂如片剂、外用软膏只见于国外市场。临床多用于痛经、闭经、胃脘、疼痛、风湿痹痛、跌打伤痛及疮痈肿痛、肠痈等症，是一种具有广泛开发前景的植物药。

目前从乳香中分离到的主要化学成分为五环三萜、四环三萜和大环二萜等化合物，其中乳香酸类及大环二萜类成分为其抗炎、抗肿瘤作用的有效成分。目前文献报道，乳香中该类活性成分的分离纯化方法为柱层析，如硅胶柱层析法。该方法不足之处是：分离周期长，回收率低，分离效果不理想，在使用硅胶柱层析分离时因长时间与硅胶填料接触而致使该类成分结构发生变化。

高速逆流色谱(High-Speed Counter-Current Chromatography，HSCCC)是利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种特殊的单向性流体动力学平衡，其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相的分离方法，是一种连续高效的液-液分配色谱分离技术。它早起源于20世纪50年代的逆流分溶法(CCD)，但由于其设备庞大复杂、易碎，容积体系容易乳化等而被一种新的液-液分配方法-“逆流色谱”代替。20世纪70～80年代，美国国立卫生院的Ito博士研制出了早期的逆流色谱仪器，包括螺旋管行星式离心分离仪(CPC)、螺旋形逆流色谱仪、流通型螺旋管行星式离心分离仪、连续洗脱型离心分离仪等。高速逆流色谱是逆流色谱技术历了近60年发展的结果，不用固体支撑体作固定相，避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅可全部回收样品，而且样品的制备量大大提高，是一种适用于中药和天然产物研究的现代化仪器，具有适用范围广、制备量大、操作简单、高效快速等优点，在生化、生物工程、医药、天然产物化学、有机合成、环境分析、食品、地质、材料等领域得到了广泛的应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种高速逆流色谱分离纯化乳香中萜类单体的方法，从而克服现有技术的不足，提供一种操作简单，产品纯度高，样品损失量小的高效快速方法。

本发明采用的技术方案如下：

一种高速逆流色谱分离纯化乳香中萜类单体的方法，步骤如下：

(1)乳香粗提物的制备：取乳香药材，粉碎，采用乙醇溶液加热提取数次，合并滤液，减压旋蒸，冷冻干燥，得到乳香粗提物；

(2)将步骤(1)获得的乳香粗提物采用水溶解，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，萃取液过滤，减压浓缩分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水萃取段；