[发明专利]一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的引物对和方法

说明书

本发明属于分子生物技术领域，提供一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的引物对和方法，该方法以与断奶仔猪肠道免疫发育相关联的免疫生化指标血清T‑AOC含量及肠黏膜SIgA含量为对象，通过分析与T‑AOC、SIgA呈负相关的候选基因FUT1和TLR4的表达水平，呈正相关的候选基因LYZ、SLA‑DQB、TAP1的表达水平，判断断奶仔猪抗应激能力。本发明根据候选基因表达情况可以快速获得断奶仔猪尤其是安徽地方品种安庆六白猪断奶仔猪的肠道粘膜免疫发育以及断奶抗应激能力的高低，减少选育过程中的复杂性，避免断奶仔猪因为受到刺激等因素导致生化指标急剧变化而与实际不符，保证了结果的准确性。

技术领域

本发明属于分子生物技术领域，涉及一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的引物对和方法。

背景技术

仔猪断奶后，短时间内免疫力下降，由于肠道结构和功能受损，容易引起疾病的发生。腹泻和水肿病是仔猪断奶后最常见的急性、致死性传染病。4～12周龄仔猪因此病原菌感染的发病率为30％～40％，发病仔猪死亡率为40％，有时甚至高达90％，这给养猪业中造成了巨大的经济损失。目前研究发现，腹泻和水肿病是由肠毒素型大肠杆菌(ETEC)的特定抗原F18黏附在猪的小肠黏膜上皮细胞刷状缘并在上面产生肠毒素引起的一种传染病。大肠杆菌进入猪肠道以后，依靠其菌毛在敏感猪肠上皮细胞刷状缘黏附，产生类肠毒素，通过渗透、引起组织胺的释放，导致血管壁损伤，水分大量渗出而引起水肿和腹泻病，是大肠杆菌F抗原致病的原因之一。目前有研究显示，西方猪种在抗ETECF18大肠杆菌病的育种工作比中国地方猪种更有优势，中国地方猪种不具备抵抗ETECF 18大肠杆菌的某个SNP标记位点。但是，在养猪生产实践中，中国地方品种猪抗腹泻和水肿病能力的确普遍比西方猪种和含外血的杂种猪强，说明中国地方品种猪在抵抗ETECF18大肠杆菌病的遗传基础上与西方猪种确实存在差异。

发明内容

本发明的目的在于以安徽地方优良品种安庆六白猪和国外引进品种长白猪为研究对象，研究两个猪种在断奶应激期免疫生化指标血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量变化。探讨品种间抗逆性和抗病力的差异，旨在找出安徽地方优良品种候选基因与肠道免疫的内在联系，筛选影响仔猪抗断奶应激能力及肠道粘膜免疫发育的相关候选基因，为今后品种选育和新品系的建立提供参考。

1.本发明提供一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的标记引物，该引物对包括FUT1、LYZ、TAP1、SLA-DQB、TLR4；其中，

引物对FUT1，正向引物序列如SEQ ID NO.1所示，反向引物序列如SEQ ID NO.2所示；

引物对LYZ，正向引物序列如SEQ ID NO.3所示，反向引物序列如SEQ ID NO.4所示；

引物对TAP1，正向引物序列如SEQ ID NO.5所示，反向引物序列如SEQ ID NO.6所示；

引物对SLA-DQB，正向引物序列如SEQ ID NO.7所示，反向引物序列如SEQ ID NO.8所示；

引物对TLR4，正向引物序列如SEQ ID NO.9所示，反向引物序列如SEQ ID NO.10所示。

2.本发明还一种比较断奶仔猪免疫生化指标差异的方法，所述免疫生化指标为血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量；该方法以与血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量呈高度负相关的候选基因FUTl和TLR4的表达水平，与血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量呈高度正相关的候选基因LYZ、SLA-DQB、TAPl的表达水平比较不同断奶仔猪个体免疫生化指标血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量差异。