[发明专利]一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的引物对和方法

权利要求书

1.一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的标记引物，其特征在于：该引物对包括FUT1、LYZ、TAP1、SLA-DQB、TLR4；其中，

引物对FUT1，正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示；

引物对LYZ，正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示；

引物对TAP1，正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示；

引物对SLA-DQB，正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示；

引物对TLR4，正向引物序列如SEQ ID NO. 9所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 10所示。

2.一种比较断奶仔猪免疫生化指标差异的方法，其特征在于：所述免疫生化指标为血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量；以与血清T-AOC含量分别呈高度负相关的候选基因FUT1和TLR4的表达水平，与肠黏膜SIgA含量分别呈高度负相关的候选基因FUT1和候选基因TLR4的表达水平，与血清T-AOC含量分别呈高度正相关的候选基因LYZ、SLA-DQB、TAP1的表达水平，与肠黏膜SIgA含量呈高度正相关的候选基因LYZ、SLA-DQB和TAP1的表达水平，比较不同断奶仔猪个体免疫生化指标血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量差异。

3.一种比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的方法，其特征在于：该方法以与断奶仔猪肠道免疫发育相关联的免疫生化指标血清T-AOC含量及肠黏膜SIgA含量为对象，通过分析与T-AOC分别呈负相关的候选基因FUT1和TLR4的表达水平，与肠黏膜SIgA分别呈负相关的候选基因FUT1和TLR4的表达水平，与T-AOC分别呈正相关的候选基因LYZ、SLA-DQB、TAP1的表达水平，与肠黏膜SIgA分别呈正相关的候选基因LYZ、SLA-DQB、TAP1的表达水平，判断断奶仔猪肠道免疫发育状况，标记基因FUT1和TLR4表达水平低、LYZ、SLA-DQB、TAP1表达水平高的断奶仔猪肠道免疫发育更良好。

4.权利要求3所述的比较断奶仔猪肠道免疫发育能力的方法，其特征在于：该方法具体包括如下步骤：（1）断奶仔猪小肠各段包括十二指肠、空肠、回肠总RNA提取；（2）引物设计：分别设计候选基因FUT1的反转录引物对FUT1、候选基因TLR4的反转录引物对TLR4、候选基因LYZ的反转录引物对LYZ、候选基因SLA-DQB的反转录引物对SLA-DQB、候选基因TAP1的反转录引物对TAP1；（3）反转录合成cDNA：使用反转录试剂盒对步骤（1）得到的总RNA合成cDNA；（4）采用步骤（2）设计的引物通过q-RT-PCR方法测定候选基因FUT1、TLR4、LYZ、SLA-DQB、TAP1在断奶仔猪个体小肠各段中的表达量；（5）根据各候选基因在不同断奶仔猪个体小肠各段的表达量的差异确定不同断奶仔猪肠道发育状况；

其中，引物对FUT1，正向引物序列如SEQ ID NO. 1所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 2所示；

引物对LYZ，正向引物序列如SEQ ID NO. 3所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 4所示；

引物对TAP1，正向引物序列如SEQ ID NO. 5所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 6所示；

引物对SLA-DQB，正向引物序列如SEQ ID NO. 7所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 8所示；

引物对TLR4，正向引物序列如SEQ ID NO. 9所示，反向引物序列如SEQ ID NO. 10所示。