[发明专利]一种哈茨木霉菌固态发酵方法

说明书

一种哈茨木霉菌固态发酵方法，它涉及一种固态发酵方法。它要解决现有的木霉菌发酵方法存在成本高，推广范围小的问题，以及稻草的再利用问题。方法：一、制备孢子悬浮液；二、制备发酵料并灭菌；三、发酵料接菌并发酵培养；四、发酵产物干燥，筛分，收集孢子粉即完成。本发明中哈茨木霉菌固态发酵方法，不仅很好的将稻草利用了起来，节约资源的同时也减少了烧荒带来的空气污染，有效的实施资源循环再利用，而且用最小的成本生产最多的有效木霉孢子粉，为后续木霉生物菌肥及生物农药剂型的制备提供原料。本发明中固态发酵方法，无需大型设备，无需严格控制生产条件，对操作环境要求低，流程简单易学，适合大范围推广使用，便于小规模生产。

技术领域

本发明涉及一种固态发酵方法。

背景技术

木霉（Trichoderma）属于半知菌亚门，丝孢纲，丝孢目，木霉属真菌。具抗病、促生长、改良土壤三大特性，世界各国纷纷将木霉应用在农林业生产中。木霉属中应用最广泛的是哈茨木霉（Trichoderma harzianum）。哈茨木霉的菌剂主要是孢子制剂，因此，大量生产木霉孢子粉才能保证制剂原料的供应。

木霉菌的小规模发酵，条件控制不好，常常导致发酵失败；而目前的发酵方法成本高、操作环境要求高，流程复杂的等问题，不适合大范围推广使用。

水稻是主要的粮食作物，种植面积广，水稻高产量的同时也产生了大量的农业废弃物—稻草，入冬的烧荒更是带来严重的空气污染，因此急需研究和推广稻草的再利用，更快更多的消耗这一农业废弃物，有效的实施资源循环再利用。

发明内容

本发明目的是为了解决现有的木霉菌发酵方法存在成本高，推广范围小的问题，以及稻草的再利用问题，而提供了一种哈茨木霉菌固态发酵方法。

一种哈茨木霉菌固态发酵方法，按以下步骤进行：

一、制备PDA斜面培养基并接种哈茨木霉菌，室温培养4～6天，然后用灭菌水洗下PDA斜面培养基上的哈茨木霉分生孢子，制备成浓度为10⁷～10⁸个孢子/mL的孢子悬浮液；

二、按重量百分比称取73.5%的稻草，25%的麦麸，0.5%的玉米面，0.5%的黄豆粉和0.5%的(NH₄)₂SO₄，加入自来水至湿度为300%，搅匀后装入聚丙烯菌袋，每袋150g，使用透气性盖子封口，然后于121℃灭菌20min，获得灭菌后的发酵料；

三、向灭菌后的发酵料中加入2mL步骤一中的孢子悬浮液，然后置于自然采光的培养室内，在温度为25～28℃，相对湿度为60%～80%的条件下培养15天；

四、培养15天后，对发酵产物进行干燥，然后通过筛分将发酵料与分生孢子分离，收集孢子粉并于4℃条件下保存，即完成哈茨木霉菌固态发酵。

本发明中哈茨木霉菌固态发酵方法，是一种有效经济可行的固态发酵方法，不仅很好的将稻草利用了起来，节约资源的同时也减少了烧荒带来的空气污染，有效的实施资源循环再利用，而且用最小的成本生产最多的有效木霉孢子粉，为后续木霉生物菌肥及生物农药剂型的制备提供原料。

本发明中哈茨木霉菌固态发酵方法，发酵料的配比合理，营养均衡，能够满足多数木霉菌的大量生长繁殖，且成本低；在发酵完成时，1000g发酵料可以产出约50g干孢子粉。

本发明中哈茨木霉菌固态发酵方法，无需大型设备，无需严格控制生产条件，对操作环境要求低，流程简单易学，适合大范围推广使用，便于小规模生产。

附图说明

图1为实施例中透气性盖子的示意图；

图2为实施例中使用透气性盖子封口后并接种了孢子悬浮液的菌袋图；

图3为实施例中发酵培养7天后的菌袋图；