[发明专利]一种哈茨木霉菌固态发酵方法

权利要求书

1.一种哈茨木霉菌(Trichodermaharzianum)固态发酵方法，其特征在于它按以下步骤进行：

一、制备PDA斜面培养基并接种哈茨木霉菌，室温培养4～6天，然后用灭菌水洗下PDA斜面培养基上的哈茨木霉分生孢子，制备成浓度为10⁷～10⁸个孢子/mL的孢子悬浮液；

二、按重量百分比称取73.5％的稻草，25％的麦麸，0.5％的玉米面，0.5％的黄豆粉和0.5％的(NH₄)₂SO₄，加入自来水至湿度为300％，搅匀后装入聚丙烯菌袋，每袋150g，使用透气性盖子封口，然后于121℃灭菌20min，获得灭菌后的发酵料；

三、向灭菌后的发酵料中加入2mL步骤一中的孢子悬浮液，然后置于自然采光的培养室内，在温度为25～28℃，相对湿度为60％～80％的条件下培养15天；

四、培养15天后，对发酵产物进行干燥，然后通过筛分将发酵料与分生孢子分离，收集孢子粉并于4℃条件下保存，即完成哈茨木霉菌固态发酵；

步骤二中所述稻草的规格为5cm的小段；

步骤三中培养期间通风：夏季开窗通风2h/d，冬季开窗通风0.5h/d；

步骤四中干燥温度38～42℃。

2.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤一中PDA斜面培养基的配制：200g马铃薯、20g葡萄糖、15g琼脂和1000mL水，装入聚丙烯大试管中，每管20mL，115℃灭菌30min后摆斜面。

3.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤一中室温培养5天。

4.根据权利要求2所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤一中聚丙烯大试管的规格：3cm口径×24cm长。

5.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤一中哈茨木霉菌为哈茨木霉菌株ACCC31959，购买自中国农业微生物菌种保藏中心；哈茨木霉菌株ACCC30371，购买自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

6.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤二中聚丙烯菌袋的规格：15cm×40cm。

7.根据权利要求1所述的一种哈茨木霉菌固态发酵方法，其特征在于步骤三中在温度为26℃，相对湿度为70％的条件下培养15天。