[发明专利]一种富钼酿酒酵母及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及人体健康和发酵工程领域，具体涉及一种富钼酿酒酵母及其制备方法。

背景技术

钼是动物、微生物及人体所必需的微量营养元素之一，是固氮酶、硝酸还原酶、黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧化酶等多种酶的重要组成成分。钼参与并影响机体内的多种代谢过程；钼能抑制乳腺癌的生长，控制食道癌及其它癌症的死亡率；钼能保护心肌，预防心脑血管疾病和肝脏疾病；同时钼对克山病、龋齿、小细胞低色素性贫血以及区域性脱发等地方病有很好的防治作用。钼能增加机体抵抗病菌的能力，提高机体免疫能力；对动物的生长有明显的促进作用。

酵母可通过吸收转化，将培养基中所含微量元素富集于自身细胞组织中，将无机微量元素改变成毒性低的有机形态，提高生物利用率和安全性；同时，酵母本身的生物活性物质对生物体也有保健作用，是富集微量元素的有效载体之一。成人每日膳食中微量元素钼需求量大约是0.1mg，因此富钼酵母作为机体钼源的补充，尤其是作为预防和治疗癌症、心脑血管疾病和肝脏疾病药物的重要功效成分已引起人们极大重视。

目前富营养元素酵母品种选育所采用的方法主要包括紫外线、微波以及化学试剂诱变等获得具有富营养元素较高的突变体酵母。以上育种方法存在一定的盲目性和随机性，过程较为繁琐。例如，紫外线诱变虽然操作比较简单，但是操作不当会对人体产生伤害，并且此方法还需要进行大量的无目的性的筛选鉴定工作。

综上所述，发明出一种可以快速准确地提高酵母钼含量的方法是非常必要的，并通过这种方法进行制备其他以酵母为载体富集多种微量元素酵母新品种也是具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种富钼酿酒酵母，其对钼的吸收富集能力强，能够提高酿酒酵母相关产品的钼含量，有效安全的补充人们所需要的必须微量元素钼。本发明的目的还在于提供所述富钼酿酒酵母的制备方法，该方法准确、生态安全、简洁实用、费用低廉、适用性广、可操作性强。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术方案：

一种富钼酿酒酵母，为能组成型表达Glym08g22300基因的酿酒酵母，所述的Glym08g22300基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

优选的，所述的富钼酿酒酵母为转化可组成型表达Glym08g22300基因的重组载体的酿酒酵母INVSC1；所述的重组载体以pAG306GPD-ccdB作为骨架载体。

所述的富钼酿酒酵母的制备方法，包括如下步骤：将Glym08g22300基因连接到酵母组成型表达载体上构建重组表达载体，再将重组表达载体转入酿酒酵母中得到富钼酿酒酵母。

所述的富钼酿酒酵母富钼能力强，可用于制备预防和/或治疗癌症、心脑血管疾病和/或肝脏疾病的药物。

一种富钼酿酒酵母的筛选方法，包括如下步骤：

（1）通过blast得到钼转运子同源基因；

（2）将同源基因连接到酵母组成型表达载体上构建重组表达载体；

（3）将重组表达载体转入酿酒酵母中；所得转化子在含钼培养基中培养后收集酵母细胞，测定钼含量。

酵母本身具有将培养基中营养元素其富集于自身细胞组织中的功能，本发明利用转基因技术把具有钼吸收功能的目的基因转入酵母中，通过测定酵母钼吸收量，获得一种可具有较高钼富集能力的酿酒酵母。本发明与现有技术相比，具有以下优点和积极效果：

（1）本发明筛选周期短，可以在较快时间内获得具有较高钼富集能力的突变体菌株；

（2）本发明生态安全，不需要物理、化学等方法进行诱变处理；

（3）本发明所获得的富钼酵母钼富集能力较高，可以有效的满足生物体所需要的钼营养。

因此，本发明具有良好的经济效益和社会效益。

附图说明

图1是转化含不同目的基因的表达载体的酵母中钼含量的柱状统计图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1

1、候选基因的确定及引物的设计