[发明专利]一种用纤维素载体固定β-葡萄糖苷酶的方法及应用在审
| 申请号： | 201610348992.6 | 申请日： | 2016-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN105779428A | 公开（公告）日： | 2016-07-20 |
| 发明（设计）人： | 姚轶俊;王立峰;鞠兴荣 | 申请（专利权）人： | 南京财经大学 |
| 主分类号： | C12N11/12 | 分类号： | C12N11/12 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 邓丽 |
| 地址： | 210046 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纤维素 载体 固定 葡萄 糖苷酶 方法 应用 | ||
1.一种纤维素载体的合成方法，其特征在于，包括以下步骤：
①取6.25g纤维素粉末溶于50ml丙酮与DMSO组成的有机溶剂中，所述丙酮与DMSO的 体积比为3:2，将所得溶液用针筒逐滴滴入冷水中，形成纤维素颗粒并将其置于室温下干燥 待用；
②量取40cm3所述纤维素颗粒置于100ml浓度为0.2mol/L的NaOH溶液中，在40℃条件下 加热90min，即得所述纤维素载体。
2.一种利用权利要求1所述合成方法制备得到的纤维素载体。
3.一种利用权利要求2所述的纤维素载体固定β-葡萄糖苷酶的方法。
4.根据权利要求3所述的固定β-葡萄糖苷酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：
①将所述40cm3纤维素载体置于50ml加热至100℃的3%的戊二醛水溶液中1h后，在室 温下用蒸馏水冲洗；
②将β-葡萄糖苷酶溶于浓度为0.1mol/L、pH6的磷酸缓冲液中形成浓度为1mg/ml的酶 溶液，并与经步骤①处理的纤维素载体在4℃条件下混合静置16h；
③用纱布将所述酶溶液滤去并保留滤液待测，用0.1mol/L、pH6的磷酸缓冲液冲洗纤 维素载体，在4℃条件下储存，即为所述固定化酶。
5.一种根据权利要求4的方法制备得到的固定化酶。
6.根据权利要求5所述的固定化酶，其特征在于，所述固定化酶的最适反应温度为50 ℃。
7.根据权利要求5所述的固定化酶，其特征在于，所述固定化酶每分钟的最大反应速率 Vmax为0.0733±0.0034mmol/L，酶动力学参数KM值为1.3826±0.2043mmol/L。
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