[发明专利]用于检测亚洲型寨卡病毒的荧光RT-PCR引物和荧光探针、试剂盒及检测方法有效
| 申请号： | 201610099248.7 | 申请日： | 2016-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN105506188B | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 黄超杰;朱海;游腾飞;付辉;卢和华 | 申请（专利权）人： | 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙) 44248 | 代理人： | 田亚军;陈本发 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市宝安区西*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 荧光探针 寨卡病毒 检测 寡核苷酸探针 反向引物 正向引物 试剂盒 荧光 特异性荧光探针 荧光RT-PCR 避免污染 动态监测 后续处理 荧光信号 内封闭 病死 单管 扩增 引物 引入 分析 | ||
1.一种用于检测亚洲型寨卡病毒的荧光RT-PCR引物和荧光探针，其特征在于：所述用于检测亚洲型寨卡病毒的荧光RT-PCR引物包括正向引物和反向引物，所述正向引物如SEQID NO：1所示的序列，所述反向引物如SEQ ID NO：2所示的序列；所述荧光探针为寡核苷酸探针，所述寡核苷酸探针如SEQ ID NO：3所示的序列；所述寡核苷酸探针的3’端标记有第一荧光淬灭基团，5’端标记有第一荧光报告基团；所述第一荧光报告基团为FAM、JOE、ROX、TET、TAMRA、HEX、VIC、CY3、CY5或Texas Red中的一种；所述第一荧光淬灭基团为BHQ、TAMRA、Eclipse、Dabcyl、Lowa BlackTM RQ或Lowa BlackTM FQ中的一种。
2.一种用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒，其特征在于：所述用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒包括RT-PCR反应液，所述RT-PCR反应液包含如权利要求1所述的用于检测亚洲型寨卡病毒的荧光RT-PCR引物和荧光探针。
3.根据权利要求2所述的用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒，其特征在于：所述RT-PCR反应液包括内标引物和内标探针，所述内标引物包括内标正向引物和内标反向引物，所述内标正向引物如SEQ ID NO：4所示的序列，所述内标反向引物如SEQ ID NO：5所示的序列，所述内标探针如SEQ ID NO：6所示的序列，其中，所述内标探针的5’端标记有第二荧光报告基团，3’端标记有第二荧光淬灭基团。
4.根据权利要求3所述的用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒，其特征在于：所述第二荧光报告基团为HEX；所述第二荧光淬灭基团为BHQ1，所述第二荧光报告基团与第一荧光报告基团为不同的基团。
5.根据权利要求4所述的用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒，其特征在于：所述用于检测亚洲型寨卡病毒的试剂盒还包括酶混合液、内标溶液、阳性质控品、阴性质控品；
所述阳性质控品为含有如SEQ ID NO：7所示序列的pUC57载体质粒；所述阴性质控品为无菌TE缓冲液；所述内标溶液为含有如SEQ ID NO：8所示序列的假病毒颗粒的溶液。
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