[发明专利]一种乌司他丁注射液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种乌司他丁注射液及其制备方法。

背景技术

乌司他丁（Ulinastatin）是从人体尿液中分离纯化的一种糖蛋白，其实质为一种胰蛋白酶抑制剂，因此也被称为人尿胰蛋白酶抑制剂(Human Urinary Trypsin Inhibitor)。Beurer和Reich等人于1909年第一次报道了人体尿液中存在这种胰蛋白酶抑制剂。乌司他丁由143个氨基酸残基组成，相对分子量为60-70KD，等电点为2.6，是一种酸性蛋白。乌司他丁主要有三个功能域：O-糖苷键连接的糖基化区域(Ala1-Lys21)、N端的Kunitz型结构域I(Lys22-Arg77)以及具有胰蛋白酶抑制活性的C端Kunitz型结构域II(Thr78-Leu143)。两个Kunitz型结构域具有一定的同源性，每个结构域中都含有6个保守的半胱氨酸，通过形成3对二硫键维持一定的空间构型。有研究标明，乌司他丁的酶抑制剂活性主要存在于其主体蛋白骨架中的Kunitz型结构域。乌司他丁特殊的分子结构决定了其多样的生物学功能。

乌司他丁具有以下药理作用：减少促炎性细胞因子的生成和释放；调节凝血功能，抑制纤溶亢进，保护血小板；稳定溶酶体膜，抑制多种水解酶活性；免疫调节作用等。因此，乌司他丁在临床抗炎、脏器保护、脑损伤神经保护、改善微循环等方面具有重要作用。当机体处于由于多发伤、严重烧伤等引起的缺血缺氧状态时，体内氧自由基增加，炎性细胞因子产生，应用乌司他丁可使过度炎性反应被抑制，从而起到保护肠黏膜的作用。乌司他丁还可抑制凝血因子Ⅴ、Ⅷ、Ⅻ等的过度激活，从而使这些凝血因子的消耗减少，有益于维护术后凝血系统的正常功能。除此之外，乌司他丁是一种蛋白酶抑制剂，对胰蛋白酶、α－糜蛋白酶、弹力蛋白酶、透明质酸酶、纤溶酶等多种蛋白酶具有良好的抑制作用。另有研究发现，应用乌司他丁可调节T细胞数量，从而调整免疫功能。临床上乌司他丁常用于急性胰腺炎、急性循环障碍的治疗；大中型手术期的器官保护；以及危重症中全身性炎症反应、多器官功能障碍综合症的预防等。

按照WHO国际药物监测合作中心的规定，药物不良反应（Adverse Drug Reactions,ADR）指正常剂量的药物用于预防、诊断、治疗疾病或调节生理机能时出现的有害的和与用药目的无关的反应。乌司他丁用于治疗急性胰腺炎的研究中显示其施用在一定程度上会引起用药对象发生皮疹、唾液分泌增多、注射部位血管痛、例恶心呕吐、ALT 升高等不良反应。目前市售的商品乌司他丁注射剂的说明书中也明确说明该药物的不良反应包括：白细胞减少或嗜酸粒细胞增多；AST、ALT上升；恶心、呕吐、腹泻；注射部位血管痛、发红、瘙痒感、皮疹等；以及过敏等。上述药物不良反应可能会引起用药者的身体不适，甚至致使病情恶化，引发新的疾病。

本发明人长期致力于乌司他丁制剂的研发工作，并取得一定效果。例如，在中国专利申请CN101439181A中公开了一种稳定的乌司他丁水针剂药物组合物，该乌司他丁水针剂药物组合物的制备方法主要包括以下几步：称取所需乌司他丁以及其他辅料于入配液桶内；加入注射用水溶解；调节pH 值；加入剩余的注射用水至所需体积；过滤除菌，灌封，包装。但该乌司他丁水针剂药物组合并不能满足实际生产中对降低乌司他丁制剂生产成本的需求。例如，在一个已公开的处方中，配制每10000万单位的乌司他丁需加入多达100g甘露醇，才能保持乌司他丁活性残留率＞99.9%。此外，目前临床使用的乌司他丁制剂多为粉针剂，其配制过程需要一定时间，在此过程中存在活性降低以及微生物污染的可能性。

因此，在降低生产成本的同时，如何最大限度地保持乌司他丁注射液中的乌司他丁活性成分在存储过程中的稳定性，并减少其药物不良反应，是其实际生产和临床使用需要解决的重要问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种稳定的、低不良反应的乌司他丁注射液及其制备方法，以解决乌司他丁制剂在临床使用中存在的问题。

在本发明中，乌司他丁单位被定义为：2μg胰蛋白酶活性被抑制50％时的乌司他丁的用量为 1 个单位。

一个方面，本发明提供了一种乌司他丁注射液，其pH值范围为6.2-6.8，其配方为，每1000支：

其中，甘露醇、氯化钠、磷酸氢二钠和磷酸二氢钠为该乌司他丁注射液的辅料成分。